詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 腫瘤抑制相關(guān)蛋白PHEMX抗體 |
英文名稱 | ART1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
?
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
聚多曲霉(薩氏曲霉)現(xiàn)貨,ATCC菌株
鏈格孢培養(yǎng),ATCC菌株
米根霉保存,ATCC菌株
淡紫色擬售價(jià),ATCC菌株
光孢短柄帚霉現(xiàn)貨,ATCC菌株
香蕉炭疽盤長孢菌培養(yǎng),ATCC菌株
許旺酵母保存,ATCC菌株
清酒酵母售價(jià),ATCC菌株
電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白α肽(ETFα)ELISA Kit for Electron Transfer Flavoprotein Alpha Polypeptide (ETFa)規(guī)格:48T/96T
賴酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 2 (LOXL2)規(guī)格:48T/96T
胸腺嘧啶核苷磷化酶(TP)ELISA Kit for Thymidine Phosphorylase (TP)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R)ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y2 (NPY2R)規(guī)格:48T/96T
組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1)規(guī)格:48T/96T
腦多巴神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)ELISA Kit for Cerebral Dopamine Neurotrophic Factor (CDNF)規(guī)格:48T/96T
血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA Kit for Angiotensin II (AngII)規(guī)格:48T/96T
分泌粒蛋白Ⅴ(SCG5)ELISA Kit for Secretogranin V (SCG5)規(guī)格:48T/96T
兒茶-O-基轉(zhuǎn)移酶(COMT)ELISA Kit for Catechol-O-Methyltransferase (COMT)規(guī)格:48T/96T
芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子(ARNT)ELISA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator (ARNT)規(guī)格:48T/96T
胰島素樣蛋白3(INSL3)ELISA Kit for Insulin Like Protein 3 (INSL3)規(guī)格:48T/96T
CD200受體1(CD200R1)ELISA Kit for CD200 Receptor 1 (CD200R1)規(guī)格:48T/96T
腫瘤抑制相關(guān)蛋白PHEMX抗體Escherichia coli分離基物: 畜禽臟器提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;
Alternaria sp.分離基物: 植物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 18-26℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Volvarila volvacea提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
Colwlia aestuarii分離基物: 水樣/上層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物/耐冷菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 15℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Nesterenkonia sp.分離基物: 沉積物/TVG沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 海洋放線菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃-30&存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
洛格酵母種屬: Saccharomyces loges提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 葡萄酒。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
Micromonospora sp.分離基物: 半天然海土提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗細(xì)菌;抗金黃色葡萄球菌培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 35-37C存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥
柱形孢鏈霉菌種屬: Streptomyces cylindrosporus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
金黃色葡萄球菌種屬: Staphylococcus aureus提供形式: 硅膠雙層管,凍干粉安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究;分析檢測。檢定抗生素,《消毒技術(shù)規(guī)范》中醫(yī)療器械滅菌效果檢測用菌,《GB 4789.2-2010菌落總數(shù)測定》陽性對照菌株,2015版中國藥典質(zhì)控菌株。無菌測試;新霉素、cefactor、阿米卡星、卡那霉素、頭孢西丁、頭孢唑啉、萘夫西林,新青二、萬古霉素、林可霉素、青霉素、妥布霉素、新霉素b、螺旋霉素、短桿菌肽、頭孢噻肟、頭孢氨芐、先鋒霉素、光神霉素、慶大霉素、強(qiáng)力霉素、甲氧西林、頭孢羥唑、頭孢菌素、氯唑西林、環(huán)絲氨酸、紅霉素、四環(huán)素、甲烯土霉素頭孢菌素、雙氯青霉素、地美環(huán)素、土霉素、土霉素羅利環(huán)素、金霉素的測定;卡那霉素、克林霉素、鏈霉素和四環(huán)素的藥敏試驗(yàn)。培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁培養(yǎng)基: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g(液體培養(yǎng)基不含),蒸餾水 1.0L,pH7.0。121℃,15min滅菌。生長條件: 37℃,好氧。生長特性: G+球菌,單個(gè)、成對、不規(guī)則堆狀排列。不生芽胞。鳥氨酸脫羧酶陰性,發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,發(fā)酵甘露醇。甲基紅反應(yīng)陽性,伏-普實(shí)驗(yàn)弱陽性。血平板菌落周圍形成透明的溶血環(huán)。產(chǎn)金黃素。兼性厭氧,適pH7.0-7.5。存儲(chǔ)條件: -20℃避光保存;運(yùn)輸條件:冰袋運(yùn)輸。