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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
金蓮橙O指示劑 | 100ml | FS-R6929 |
產(chǎn)品分類:指示劑
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:單一酸堿指示劑
注意事項:又稱間苯二酚磺,金蓮橙O變色范圍:11.0-13.0,顏色由黃綠變?yōu)槊倒迳?/span>
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
根瘤菌磷化受體酪激c-Abl抗體Human MANSC1 ELISA Kit小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒
芹側(cè)耳(杏鮑菇)β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體(X11α)Human MAP4K1(MEK Kinase Kinase 1) ELISA Kit小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)免疫試劑盒
海神魯杰氏菌載脂蛋白E抗體Human MAGEC3 ELISA Kit小鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬甲胎蛋白AFP抗體Human MAK ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體4(TRAIL-R4)免疫試劑盒
類銀白紫絲膜菌陰離子交換蛋白2抗體Human MAP4K2 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)免疫試劑盒
釀酒酵母鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體Human MAGED2 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)免疫試劑盒
球孢白僵菌三磷腺苷家族蛋白3A抗體Human MAGED1( MAGE family member D1) ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)免疫試劑盒
Pseudomonas plecoglossicida 載脂蛋白J抗體Human MAGEF1 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員11A(TNFRSF11A/RANK)免疫試劑盒
海棗曲霉載脂蛋白H抗體Human MAGED4 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子配體相關(guān)分子-1(TL1)免疫試劑盒
棲植物潘亞堿湖桿菌二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移4抗體Human MAGEH1 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)免疫試劑盒
馬褂木炭疽盤孢菌AKIRIN2蛋白抗體Human MBD2 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)免疫試劑盒
阿姆斯特丹曲霉ADP核糖基化樣因子8B抗體Human MC3R(Melanocortin receptor 3) ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)免疫試劑盒
蒙氏假單胞菌三磷腺苷家族蛋白2抗體Human MBD3(Methyl-CpG-binding domain protein 3) ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體免疫試劑盒
糙皮側(cè)耳AKIRIN1蛋白抗體Human MBD4 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒
暗產(chǎn)色鏈霉菌錨定蛋白樣蛋白1抗體Human MARK4 ELISA Kit小鼠腫瘤標志物(CA724)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌腺苷激2抗體Human MBD5(Methyl-CpG-binding domain protein 5) ELISA Kit小鼠中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)免疫試劑盒
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR表皮生長因子受體試劑盒鹽白屈菜紅堿
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學級表皮生長因子試劑盒銀杏
蠟狀芽孢桿菌Bacillus cereus 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學級表睪野菊花內(nèi)酯
金蓮橙O指示劑CK-19(Human cytokeratin 19) ELISA Kit 人細胞角蛋白19規(guī)格: 48T
CK-18(Human cytokeratin 18) ELISA Kit 人細胞角蛋白18規(guī)格: 48T
CgA(Human Chromogranin) ELISA Kit 人嗜鉻蛋白A規(guī)格: 48T
pRB(Human retinoblastoma tumor suppressor protein) ELISA Kit 人shi網(wǎng)膜母細胞瘤抑制蛋白規(guī)格: 48T
MPF(Human maturation promoting factor) ELISA Kit 人成熟促進因子規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。