CGS緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品：豚鼠抗糖蛋白抗體(GP)試劑盒 Anti-IL10 Antibody瞬時受體電位離子通道蛋白3抗體（M亞家族）
豚鼠表面膜球蛋白D(mIgD)試劑盒 Anti-IL10 Antibody雌反應(yīng)鋅指蛋白抗體
豚鼠白介素4(IL-4)試劑盒Anti-IL10 AntibodyTWIST蛋白2抗體抗體
豚鼠絲蛋白酶8(PRSS8)試劑盒Anti-IL10 Antibody

產(chǎn)品分類：細胞其他

儲存條件：4℃,3個月

用途：由檸檬酸鈉、葡萄糖、氯化鈉等組成。

注意事項：含葡萄糖等營養(yǎng)成分，應(yīng)注意避免污染

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

右佐匹克（標(biāo)準品） (R)-(?)-Mandelic acid雌激受體α抗體包裝250mg

魚腥草鈉（標(biāo)準品） 1-Aminohydantoin Hydrochloride內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體包裝1g

愈創(chuàng)甘油（標(biāo)準品） 1-Aminohydantoin HydrochlorideEphrin A2抗體包裝5g

愈創(chuàng)木磺（標(biāo)準品） ACTH (1-24), human大腸埃希菌菌體蛋白抗體包裝1g

遠華蟾蜍精(標(biāo)準品) Bradykinin雌激硫轉(zhuǎn)移抗體包裝25g

月桂（標(biāo)準品） Bradykinin acetateE Tag標(biāo)簽抗體包裝5g

孕三烯（標(biāo)準品） α-MSH登革熱病包膜糖蛋白E抗體包裝25g

扎來普（標(biāo)準品） Endothelin-1, human,porcine食道癌相關(guān)基因抗體包裝5g

(標(biāo)準品) BombesinEB病核抗原-3A抗體包裝500g

扎托(標(biāo)準品) VIP, human, porcine, rat; VIP (28 amino acids)膠質(zhì)谷運載蛋白1抗體包裝1g

正己（標(biāo)準品） Agarose轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝5g

正十九烷（標(biāo)準品） PEG 400內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1抗體包裝1mg

正十五烷（標(biāo)準品） Cholestyramine resin外基質(zhì)蛋白1抗體包裝5mg

芝麻(標(biāo)準品) Sucrose外胚層發(fā)育不良抗體包裝25g

酯蟾配基；蟾力蘇(標(biāo)準品) D-(+)-Trehalose, dihydrate E2 tag標(biāo)簽抗體包裝5g

伊小單孢菌澄江變種Micromonospora│inyoensis var. dengjiangensis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準品糖化血紅蛋白A1c試劑盒3,4,5-三氧基酯;Meth

卷曲乳桿菌Lactobacillus│crispatus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR糖化低密度脂蛋白試劑盒石杉堿;(-)-Huperzine A

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準品糖化白蛋白試劑盒楊酯;Birch-Me
CGS緩沖液PILR Beta/FDFACT/FITC  熒光標(biāo)記Ⅱ型成對免疫球蛋白樣受體β蛋白IgG

RECK/FITC  熒光標(biāo)記金屬蛋白抑制因子RECKIgG

SHP-1/FITC  熒光標(biāo)記造血IgG

RIP2/FITC  熒光標(biāo)記受體結(jié)合絲氨蘇氨激2IgG

SHIP1/FITC  熒光標(biāo)記SH2結(jié)構(gòu)含肌SHIP1IgG

Phospho-SHIP1 (Tyr20) /FITC  熒光標(biāo)記化SH2結(jié)構(gòu)含肌SHIP1IgG

SHP2/PTPN11/FITC  熒光標(biāo)記蛋白酪氨2IgG

Phospho-SHIP2 (Tyr580)/FITC  熒光標(biāo)記化蛋白酪氨2IgG