詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物3C抗體 |
英文名稱 | APOBEC3C |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
木素木霉 Trichodermaligrum(Tode)Harz
康寧木霉 TrichodermakoningiiOudem
雅致枝霉 ThaminidiumelegansLinkexGary
綠穗霉 Spicariapresina(Maublanc)Sawada
根霉屬的種 Rhizonussp.
三寶壟根霉 RhizopussemaranzensisTakeda
點(diǎn)頭根霉 RhizopusreflexusBainier
黑菇、煙色紅菇 Russulaadusta(Pers.)Fr.
鳳尾菇、漏斗狀側(cè)耳 Pleurotussajor-caju(Fr.)Sing.
美味側(cè)耳、紫孢側(cè)耳 Pleurotussapidus(Schulz)Sacc.
BGLB肉湯250克BGLB Broth用于水樣中大腸菌的檢測
TSP肉湯基礎(chǔ)250克Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base蠟樣芽孢桿菌的MPN值測定
胰酶大豆瓊250克TSA用于生物制品的無菌試驗(yàn)
胰胨大豆瓊斜面250克Tryptic Soy Agar培養(yǎng)副溶血性弧菌,做細(xì)胞色素氧化酶實(shí)驗(yàn)
BiGGY瓊250克BiGGY Agar用于念珠菌的分離培養(yǎng)
硝孟加拉紅瓊250克DRBC Agar食品中霉菌及酵母菌的分離培養(yǎng)
溴紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基250克BCP Glucase Peptone Water Medium用于壓力蒸汽滅菌效果評價(jià)
胰酪胨大豆肉湯250克TSB一種通用的微生物營養(yǎng)增菌肉湯,也可用于金黃色葡萄球菌的MPN測定和線無菌灌裝試驗(yàn)
堿性蛋白胨水250克AP增殖霍亂弧菌及付霍亂弧菌
孟加拉紅培養(yǎng)基250克Rose Bengal Agar霉菌和酵母菌的總數(shù)測定
WORT瓊250克WORT Agar用于真菌,特別是酵母菌的計(jì)數(shù)和增菌培養(yǎng)
WORT肉湯250克WORT Broth真菌和酵母菌的培養(yǎng)
載脂蛋白B-mRNA編輯酶復(fù)合物3C抗體Monascus sanguineus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食品及食品增色用。培養(yǎng)基: CM0085生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Streptomyces sp.分離基物: 表面土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)及微生物藥物學(xué)的研究培養(yǎng)基: 12生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;其他
嗜硝假絲酵母種屬: Candida nitrativorans提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Phlinus adamantinus (Berk.) Ryvarden分離基物: 子實(shí)體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Microbacterium sp.分離基物: 沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗重金屬砷,可用于抗砷機(jī)制的研究;可用于生物修復(fù)。培養(yǎng)基: 745生長條件: 18-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bacillus sp.分離基物: 活性污泥提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
產(chǎn)氨短桿菌種屬: Brevibacterium ammoniagenes提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)核酸類物質(zhì)。培養(yǎng)基: CM0502生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
盲腸腸球菌種屬: Enterococcus cecorum分離基物: chicken caeca提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0221生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pleurotus ostreatus (Jacq.) P. Kumm.分離基物: 楊樹提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法