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公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
結晶紫-檸檬酸染色液 | 100ml | FS-R7152 |
產品分類:染色其他
儲存條件:室溫,6個月
用途:生物染色
注意事項:主要由結晶紫和0.1M檸檬酸組成。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
DB (彌漫大B淋巴瘤) (通過STR鑒定)雙特異性蛋白磷26抗體(絲裂原活化蛋白激磷8)Human PPP2R4(Serine/threonine-protein phosphatase 2A activator) ELISA Kit人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)免疫試劑盒
炭疽芽胞桿菌阿米洛結合蛋白1抗體Human PPME1 (Protein phosphatase methylesterase 1) ELISA KIT人ras同源物基因家族成員b(RHOB)免疫試劑盒
*蛹蟲草S期激活化蛋白DBF4A抗體Human PSKH1 (Serine/threonine-protein kinase H1) ELISA KIT人Q熱科克斯體2(Q fever)抗體(IgM)免疫試劑盒
離中不粘柄菌著絲粒相關蛋白DSN1抗體Human PTH1R(PaRathyroid hormone/paRathyroid hormone-related peptide receptor) ELISA Kit人Q熱科克斯體2(Q fever)抗體(IgG)免疫試劑盒
海洋沉積物芽孢桿菌雙皮層蛋白結構域蛋白DCDC2抗體Human PARG (Poly(ADP-ribose) glycohydrolase) ELISA KIT人Q熱科克斯體1(Q fever)抗體(IgG)免疫試劑盒
彎曲假單胞菌神經干樹突調節(jié)蛋白DAGLα抗體Human NKAP(NF-kappa-B-activating protein) ELISA Kit人Q熱科克斯體1(Q fever)抗體(IgA)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌對接蛋白4抗體Human PTPRCAP (Protein tyrosine phosphatase receptor type C-associated protein) ELISA KIT人P選擇(P-Selectin/CD62P)免疫試劑盒
芽胞桿菌DULLARD蛋白抗體Human PACRGL (PACRG-like protein) ELISA KIT人P物質受體(SP-R)免疫試劑盒
生黑鏈霉菌絲/蘇蛋白激MNB抗體Human PCID2 (PCI domain-containing protein 2) ELISA KIT人p物質(SP)免疫試劑盒
大腸埃希菌無胸腺癥相關蛋白DGCR6/迪格爾格綜合征關鍵基因6抗體Human PELI3 (E3 ubiquitin-protein ligase pellino homolog 3) ELISA KIT人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌朊蛋白DPL抗體Human PDIK1L (Serine/threonine-protein kinase PDIK1L) ELISA KIT人Prominin 2(PROM2)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌肌強直性營養(yǎng)不良蛋白激抗體Human MYH11(Myosin-11) ELISA Kit人Podocin 免疫試劑盒
粘土壤桿菌有絲分裂控制蛋白dis3抗體Human PAM (Peptidyl-glycine alpha-amidating monooxygenase) ELISA KIT人PL7抗體/抗蘇酰tRNA合成(PL7)免疫試劑盒
解鳥柔武氏菌肝癌新基因3蛋白抗體Human SLC51A (Organic solute transporter subunit alpha) ELISA KIT人PL12抗體/抗酰tRNA合成(PL12/AlaRS)免疫試劑盒
普雷恩毛霉Dapper2蛋白抗體Human PTRHD1 (Putative peptidyl-tRNA hydrolase PTRHD1) ELISA KIT人PC4,SFRS1互動蛋白1(PSIP1)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Dapper3蛋白抗體Human PEMT (Phosphatidylethanolamine N-methyltransferase) ELISA KIT人P53抗體免疫試劑盒
CBS228.60資源名稱: 齒孢青霉 質量規(guī)格:1000µg/mL,基體:10%HCL囊
島生異擔子菌Heterobasidion│insulare 質量規(guī)格:500mg/L,溶劑:山梨
肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質量規(guī)格:100mg/L,基體:1%HCI補骨脂查爾
結晶紫-檸檬酸染色液mIgM(Human membrane IgM) ELISA Kit 人表面膜免疫球蛋白M規(guī)格: 48T
mIgD(Human membrane IgD) ELISA Kit 人表面膜免疫球蛋白D規(guī)格: 48T
KIR(Human killer cell immnoglobulin-like receptor) ELISA Kit 人殺傷細胞免疫球蛋白樣受體規(guī)格: 48T
KLR(Human killer cell lectin-like receptor) ELISA Kit 人殺傷細胞凝集su樣受體規(guī)格: 48T
APC(Human activated protein C) ELISA Kit 人活化蛋白C規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。