詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
產品名稱 | 細胞角蛋白3+12抗體 |
英文名稱 | Cytokeratin 3+12 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產品品質,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
刀豆蛋白A (四型,IV) Mycophelic Acid AcylβDglucuronide 質量規(guī)格:美國進口血液線粒體和核DNA雙提試劑盒
刀豆蛋白A (五型,V) Amoxicillind4 質量規(guī)格:美國進口一管式拭子DNAout
刀豆蛋白A (六型,VI) Amoxicillin trihydrate 質量規(guī)格:美國進口柱式凋亡DNAout(停產)
膠原蛋白 (牛) Dihydro Fefibrate 質量規(guī)格:美國進口柱式動物DNAout
膠原蛋白 (人) Choline Fefibrate 質量規(guī)格:美國進口柱式凍存血液DNAout
膠原蛋白 (大鼠) Probenecid Acyl βDGlucuronide 質量規(guī)格:美國進口柱式凍存血液DNAout
親和素 rfloxacind5 質量規(guī)格:美國進口柱式糞便DNAout
植物血凝素E 4Oxo rfloxacin 質量規(guī)格:美國進口柱式骨骼DNAout
植物血凝素L NHydroxy rfloxacin 質量規(guī)格:美國進口柱式海洋動物DNAout
植物血凝素M rfloxacind8 質量規(guī)格:美國進口柱式昆蟲DNAout
植物血凝素P rfloxacin nicotinate 質量規(guī)格:美國進口柱式毛發(fā)DNAout
RPMI640 培養(yǎng)基(... Cimetidined3 質量規(guī)格:美國進口柱式尿液DNAout
大豆蛋白胨 NDesmethyl Clozapined8 質量規(guī)格:美國進口柱式凝固血液DNAout
巰基鈉 NDesmethyld3 Zolmitriptan 質量規(guī)格:美國進口柱式軟體動物DNAout
酵母源 (含基) Didesmethyl Zolmitriptan 質量規(guī)格:美國進口柱式石蠟包埋組織DNAout2.0(二代測序)
酵母源 (無基) NDesmethyl Zolmitriptan 質量規(guī)格:美國進口柱式石蠟包埋組織DNAout(見關聯(lián)產品)
酵母粉 Zolmitriptan xide 質量規(guī)格:美國進口柱式拭子DNAout
細胞角蛋白3+12抗體200mg土壤有效測試盒9011-18-1476-28-896T趨化子C-X-C-元受體3(CXCR3)HPLC≥98%抗絨膜促性腺激素抗體檢測試劑盒20mgPGE126016-99-9化學試劑內皮素2(EDN2)250mg土壤有效測試盒9011-18-1477-19-096T趨化子C-X-C-元受體3(CXCR3)HPLC≥98%抗染色質解旋酶DNA結合蛋白4檢測試劑盒20mgPGE226016-99-9化學試劑腓骨蛋白7(FBLN7)
250mg土壤有效測試盒9011-18-1477-19-096T趨化子C-X-C-元受體3(CXCR3)HPLC≥98%抗染色質解旋酶DNA結合蛋白4檢測試劑盒20mgPGE226016-99-9化學試劑腓骨蛋白7(FBLN7)500mg土壤有效硅測試盒9011-18-17084-24-496TB-細胞淋巴瘤子2(Bcl2)HPLC≥98%抗染色體抗體檢測試劑盒5mgPGF2α39831-55-5化學試劑四旋蛋白6(TSPAN6)
500mg土壤有效硅測試盒9011-18-17084-24-496TB-細胞淋巴瘤子2(Bcl2)HPLC≥98%抗染色體抗體檢測試劑盒5mgPGF2α39831-55-5化學試劑四旋蛋白6(TSPAN6)125mg土壤全鐵測試盒9011-18-16155-35-796TB-細胞淋巴瘤子2(Bcl2)HPLC≥98%抗縮酶檢測試劑盒20mgPTGFR39831-55-5化學試劑四旋蛋白7(TSPAN7)
125mg土壤全鐵測試盒9011-18-16155-35-796TB-細胞淋巴瘤子2(Bcl2)HPLC≥98%抗縮酶檢測試劑盒20mgPTGFR39831-55-5化學試劑四旋蛋白7(TSPAN7)20mg土壤有效測試盒9011-18-1135293-13-996TB-細胞淋巴瘤子2(Bcl2)HPLC≥98%抗鞘脂抗體檢測試劑盒5mgPAP39831-55-5化學試劑四旋蛋白8(TSPAN8)
20mg土壤有效測試盒9011-18-1135293-13-996TB-細胞淋巴瘤子2(Bcl2)HPLC≥98%抗鞘脂抗體檢測試劑盒5mgPAP39831-55-5化學試劑四旋蛋白8(TSPAN8)25mg土壤有效測試盒9011-18-15957-80-296T胱天蛋白酶3(CASP3)HPLC≥98%抗鞘脂抗體檢測試劑盒20mgPSMA37517-28-5化學試劑四旋蛋白9(TSPAN9)