詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9抗體 |
英文名稱 | ABCA9 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
蘇丹II/蘇丹2/溶劑橙7 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BS純度:≥98%
蘇丹Ⅲ/III/溶劑紅23 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BS純度:≥98%
蘇丹Ⅳ4/溶劑紅24 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BS純度:≥98%
油紅O/溶劑5B 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BS純度:≥98%
G/溶劑紅1/油紅113 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BS純度:≥98%
蘇丹/溶劑黑3 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BS(生物染色)純度:≥99%
B 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:AR純度:≥98%
/溶劑紅19/脂肪紅7B 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BS純度:≥98%
蘇丹藍(lán)II/溶劑藍(lán)35 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BS純度:≥98%
基紅 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥97%
間基紅 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥98%
基紅鈉鹽/性紅2 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:0.95
西諾沙星;新惡 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,進(jìn)分純度:0.95
19去4雄二 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥98%
達(dá)格列凈一水丙二 ;丙二達(dá)格列嗪水合物 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%純度:≥98%
安塞曲匹/膽固脂轉(zhuǎn)移蛋白阻滯劑 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%純度:≥98%
TMED4 跨膜蛋白TMED4一抗 * 0.2ml Atomoxetine HCl
NRIP 雄激素受體復(fù)合物相關(guān)蛋白一抗(核受體相互作用蛋白) * 0.2ml Atomoxetine HCl
PCMT1 天門冬氨基轉(zhuǎn)移酶PCMT一抗 * 0.2ml Atovaquone
ERRB2/Estrogen Related Receptor beta 雌激素相關(guān)受體β一抗 * 0.2ml Atovaquone
ESRRG/Estrogen Related Receptor gamma 雌激素受體相關(guān)蛋白3一抗 * 0.2ml Axitinib
RDH11 視黃脫酶11一抗(丙型肝炎病毒核心蛋白) * 0.2ml Azaperone
ROR1/ROR alpha 維相關(guān)孤兒受體α一抗 * 0.2ml Azasetron HCl
RORB 維相關(guān)孤兒受體β一抗 * 0.2ml Azelastine base
三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9抗體Bacillus cereus分離基物: 水樣/深層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 深海細(xì)菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
膀胱炎棒桿菌種屬: Corynebacterium cystitidis分離基物: Urine of cow提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 210生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Roseivivaxsediminis種屬: Roseivivaxsediminis分離基物: 鹽礦沉積物,堿湖,云南省,中國安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 102生長條件: 28℃
Streptococcus thermophilus分離基物: 酸牛奶提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0005生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Kocuria kristinae分離基物: 生物樣/野生黃瓜魚/小腸和小腸內(nèi)容物提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 共生微生物/野生黃瓜魚腸道共生菌培養(yǎng)基: 33生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Monacrosporium lysipagum分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 18生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法
Streptomyces sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗草分枝桿菌培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥
Thalassospira sp.分離基物: 沉積物/土灰色沉積物16-18cm提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 1、海洋石油污染生物修復(fù); 2、生物活性物質(zhì)篩選。培養(yǎng)基: 821生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pseudomonas alcaligenes提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法