碘化鉀淀粉指示劑公司正在銷售的產(chǎn)品：雞神經(jīng)鈣黏蛋白(NCAD)試劑盒 Anti-ARHGEF11 Antibody基質(zhì)金屬蛋白酶9
雞δ樣蛋白1同源物(DLK-1)試劑盒Anti-ARHGEF12 Antibody牛結(jié)核桿體蛋白
雞干因子(SCF)試劑盒Anti-ARHGEF12 AntibodyMuellerian抑制因子抗原
雞凝血酶受體(TR)試劑盒Anti-ARHGEF19 Antibod

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：指示劑

儲(chǔ)存條件：4℃,3個(gè)月

用途：氧化還原指示劑，主要用于碘量法。

注意事項(xiàng)：遇碘變?yōu)樗{(lán)色。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

黑曲霉alpha 1腎上腺能受體B抗體Human HERC4 ELISA Kit小鼠高敏甲狀腺(u-T4)免疫試劑盒

根霉屬Bcl2 alpha蛋白抗體Human HINFP ELISA Kit小鼠高密度脂蛋白膽固(HDL-C)免疫試劑盒

Risungbinella白抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體Human HERPUD2 ELISA Kit小鼠高靈敏度促甲狀腺激(U-TSH)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌枯草亞種BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白1（型肝炎病的NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8）抗體Human HERC5 ELISA Kit小鼠高爾基蛋白73(GP-73)免疫試劑盒

鏈格孢BCL7B蛋白抗體Human HESX1 ELISA Kit小鼠高半胱(Hcy)免疫試劑盒

灰藍(lán)毛霉堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)抗體Human HES5 ELISA Kit小鼠肝脂(HL)免疫試劑盒

草假單胞菌B白血病/淋巴瘤蛋白7抗體Human HECTD1 ELISA Kit小鼠肝臟型脂肪結(jié)合蛋白(L-FABP)免疫試劑盒

異常漢遜酵母異常變種先天性脂肪代謝障礙蛋白2抗體（常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17）Human HEXA ELISA Kit小鼠肝生長(zhǎng)因子受體(c-MET/HGFR)免疫試劑盒

黃柄曲霉B遷移基因1抗體Human HECTD2 ELISA Kit小鼠肝生長(zhǎng)因子激活物(HGFAC)免疫試劑盒

毛殼(菌)科脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白BEAN1抗體Human HECTD3 ELISA Kit小鼠肝生長(zhǎng)因子(HGF)免疫試劑盒

腫紅皮孔菌B7H6蛋白抗體Human HELT ELISA Kit小鼠甘油三酯(TG)免疫試劑盒

釀酒酵母B特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體Human HELB ELISA Kit小鼠甘油-3-磷脫氫(GAPDH/G3PDH)免疫試劑盒

梨形卷枝霉橋連整合因子蛋白抗體Human HELLS ELISA Kit小鼠干因子/肥大生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)免疫試劑盒

裂孔平伏菌BADH2抗體(水稻)Human HEMGN ELISA Kit小鼠干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒

海洋桿菌丁酰酯單克抗體Human HDDC2 ELISA Kit小鼠干擾調(diào)節(jié)因子5(IRF5)免疫試劑盒

嗜堿假單胞菌磷化β 連環(huán)蛋白抗體Human HDDC3 ELISA Kit小鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)免疫試劑盒

針層孔菌Phellinus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRγ谷-半胱合成試劑盒鯊肌

葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BCγ干擾誘導(dǎo)蛋白16/p16試劑盒石杉?jí)A乙

: ATCC23218=CCM2713=CIP107115=DSM43111=IAM14287資源名稱: 達(dá)松維爾擬諾氏菌達(dá)松維爾亞種 質(zhì)量規(guī)格：BRγ干擾誘導(dǎo)單核因子試劑盒三尖杉?jí)A
碘化鉀淀粉指示劑ANNA-2/Ri(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit  人抗神經(jīng)元核2型/抗Ri規(guī)格： 48T

hnRNP/RA33(Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/RA33-antibody) ELISA Kit  人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33規(guī)格： 48T

Q-Ab(Human Q fever antibody) ELISA Kit  人抗Q熱規(guī)格： 48T

PM-Scl/PM-1(Human polymyositis-sclerosis antibody) ELISA Kit  人抗多發(fā)性肌炎硬皮病規(guī)格： 48T

Human PL7-antibody ELISA Kit  人PL7/抗蘇氨酰tRNA合成mei規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。