詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體 |
英文名稱 | CNOT6 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
瓊脂糖(Biowest,電泳級);西班牙瓊脂糖 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:進(jìn)口原裝Biowest 111860;電泳級純度:>95%
聚乙二400 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR純度:>95%
消膽樹脂;考來 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:Each g exchanges 1.8 g 2.2 g of sodium glycocholate純度:>95%
蔗糖 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分子生物學(xué)級純度:>95%
D海藻糖二水 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥98%,BR純度:>95%
化鈉 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,AR純度:>95%
鹽胍 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級純度:>95%
側(cè)金盞花,阿東糖,核糖 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97.0%(GC) ,進(jìn)口純度:>95%
酵母浸粉;酵母粉 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:FMB Grade純度:>95%
核糖核酶 A 溶液 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分子生物學(xué)級,>60 U/mg,10 mg/ml純度:>90%
D葡萄糖一水 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:>90%
十二基鈉(分子生物學(xué)級) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級純度:>90%
聚乙二6000 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:分子量5,000~7,000,分子生物學(xué)級純度:>95%
吐溫20 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:CP純度:>90%
曲拉通X100 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級純度:>95%
胰蛋白胨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:FMB Grade純度:>95%
Mycobacterium human 人結(jié)核桿體蛋白一抗 * 0.2ml Drospirene
NFATc4 T細(xì)胞激活核轉(zhuǎn)錄因子4一抗 * 0.2ml Drospirene
Unc183 突觸囊泡融合蛋白Unc183一抗 * 0.2ml Ethiny Estradiol
caspase8 subunit p18 半胱氨蛋白酶8一抗 * 0.2ml Ethiny Estradiol
IRAK1 白介素1受體相關(guān)激酶1一抗 * 0.1ml Ethionamide
phosphoAPE(Ser1417) 化肌動蛋白結(jié)合蛋白Girdin一抗 * 0.1ml Ethionamide
PRDM1/Blimp1 B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)成熟蛋白1一抗 * 0.2ml Etravirine
Dlx1 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX1一抗 * 0.2ml Famotidine
細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體50mg單寧含量檢測試劑盒 紫外分光光度法9004-54-0107-43-796T凝血酶/抗凝血酶復(fù)合體(TAT)HPLC≥98%抗肌內(nèi)膜抗體檢測試劑盒20mgKIR61477-96-1化學(xué)試劑蛋白O-甘露糖轉(zhuǎn)移酶2(POMT2)250mg單寧含量檢測試劑盒 微量法9004-54-064849-39-496T凝血酶/抗凝血酶復(fù)合體(TAT)HPLC≥98%抗肌內(nèi)膜檢測試劑盒20mgCTMOMP65710-07-8化學(xué)試劑外周蛋白(PRPH)
250mg單寧含量檢測試劑盒 微量法9004-54-064849-39-496T凝血酶/抗凝血酶復(fù)合體(TAT)HPLC≥98%抗肌內(nèi)膜檢測試劑盒20mgCTMOMP65710-07-8化學(xué)試劑外周蛋白(PRPH)50mg脫羧酶(PDC)活性檢測試劑盒 紫外分光光度法9004-54-02306-27-696T纖溶酶/抗纖溶酶復(fù)合體(PAP)HPLC≥98%抗肌集鈣蛋白抗體檢測試劑盒20mgSDH65710-07-8化學(xué)試劑過化還原酶3(PRDX3)
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