詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 膽固醇24羥化酶抗體 |
英文名稱 | CYP46 |
規(guī)格 | 0.2ml |
?
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
磚紅色微桿菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
膠狀溶桿菌培養(yǎng),ATCC菌株
檸檬色短小桿菌保存,ATCC菌株
吉氏芽孢桿菌售價(jià),ATCC菌株
蠟質(zhì)芽孢桿菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
淀粉液化芽孢桿菌培養(yǎng),ATCC菌株
冬青節(jié)桿菌保存,ATCC菌株
放射形根瘤菌售價(jià),ATCC菌株
Clavesin 2蛋白(CLVS2)ELISA Kit for Clavesin 2 (CLVS2)規(guī)格:48T/96T
突觸回蛋白4(SYNGR4)ELISA Kit for Synaptogyrin 4 (SYNGR4)規(guī)格:48T/96T
N-酰轉(zhuǎn)移酶10(NAT10)ELISA Kit for N-Acetyltransferase 10 (NAT10)規(guī)格:48T/96T
轉(zhuǎn)谷酰酶5(TGM5)ELISA Kit for Transglutaminase 5 (TGM5)規(guī)格:48T/96T
M-期磷蛋白6(MPHOSPH6)ELISA Kit for M-Phase Phosphoprotein 6 (MPHOSPH6)規(guī)格:48T/96T
高爾基體蛋白A4(GOLGA4)ELISA Kit for Golgin A4 (GOLGA4)規(guī)格:48T/96T
酯酶D(ESD)ELISA Kit for Esterase D (ESD)規(guī)格:48T/96T
磷酰絲脫羧酶(PISD)ELISA Kit for Phosphatidylserine Decarboxylase (PISD)規(guī)格:48T/96T
視黃醇飽和酶(RETSAT)ELISA Kit for Retil Saturase (RETSAT)規(guī)格:48T/96T
卵質(zhì)酶1(OVCH1)ELISA Kit for Ovochymase 1 (OVCH1)規(guī)格:48T/96T
二羰基/L-木糖還原酶(DCXR)ELISA Kit for Dicarbonyl/L-Xylulose Reductase (DCXR)規(guī)格:48T/96T
角化蛋白(CNFN)ELISA Kit for Cornifelin (CNFN)規(guī)格:48T/96T
膽固醇24羥化酶抗體200mg總糖含量檢測試劑盒 可見分光光度法9011-18-113463-28-096TM2-型激酶(PKM2)HPLC≥98%抗腎小球底膜檢測試劑盒20mgGrp7861336-70-7化學(xué)試劑停靠蛋白2(DOK2)200mg總糖含量檢測試劑盒 微量法9011-18-1552-58-996T凝血子Ⅱ(F2)HPLC≥98%抗腎小管底膜抗體檢測試劑盒20mgGOD65277-42-1化學(xué)試劑??康鞍?(DOK3)
200mg總糖含量檢測試劑盒 微量法9011-18-1552-58-996T凝血子Ⅱ(F2)HPLC≥98%抗腎小管底膜抗體檢測試劑盒20mgGOD65277-42-1化學(xué)試劑停靠蛋白3(DOK3)100mg轉(zhuǎn)酶-2活性檢測試劑盒 紫外分光光度法9011-18-11731-92-696T凝血子Ⅱ(F2)GC≥99%抗腎上腺皮質(zhì)抗體檢測試劑盒20mgGIP65277-42-1化學(xué)試劑??康鞍?(DOK4)
100mg轉(zhuǎn)酶-2活性檢測試劑盒 紫外分光光度法9011-18-11731-92-696T凝血子Ⅱ(F2)GC≥99%抗腎上腺皮質(zhì)抗體檢測試劑盒20mgGIP65277-42-1化學(xué)試劑??康鞍?(DOK4)20mg轉(zhuǎn)酶-2活性檢測試劑盒 微量法9011-18-1152743-19-696T前動(dòng)力蛋白受體2(PKR2)HPLC≥98%抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體檢測試劑盒20mgGLUT165277-42-1化學(xué)試劑停靠蛋白5(DOK5)
20mg轉(zhuǎn)酶-2活性檢測試劑盒 微量法9011-18-1152743-19-696T前動(dòng)力蛋白受體2(PKR2)HPLC≥98%抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體檢測試劑盒20mgGLUT165277-42-1化學(xué)試劑??康鞍?(DOK5)200mg植物態(tài)含量檢測試劑盒 微量法9011-18-1108853-14-196T牛血清白蛋白(BSA)HPLC≥95%抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體檢測試劑盒20mgGLUT298079-52-8化學(xué)試劑停靠蛋白6(DOK6)
200mg植物態(tài)含量檢測試劑盒 微量法9011-18-1108853-14-196T牛血清白蛋白(BSA)HPLC≥95%抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體檢測試劑盒20mgGLUT298079-52-8化學(xué)試劑??康鞍?(DOK6)200mg植物態(tài)含量檢測試劑盒 可見分光光度法9011-18-12115-91-596T免疫球蛋白G3(IgG3)HPLC≥98%抗神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白檢測試劑盒20mgPA98079-52-8化學(xué)試劑??康鞍?(DOK7)