詳細介紹
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴增相關(guān)。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時,熒光基團發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應(yīng)時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切,使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:ATTO 465
貨號:FSP213
產(chǎn)品規(guī)格:1mg/5mg/100mg
分類:熒光核酸試劑
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析。
提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標準曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
柱式植物 RNAout50 次說明書RRM1 Antibody100 ul
RNase-free 異硫酸胍溶液 ,5M100mL品牌LPP (8B3A11) Mouse mAb100 ul
豬αN乙酰葡糖糖苷酶(NAGLU)分析檢測試劑盒Vimentin (5G3F10) Mouse mAb300 ul
小鼠酸性磷酸酶(ACP)分析檢測試劑盒Phospho-c-Kit (Tyr719) Antibody100 ul
小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)分析檢測試劑盒Phospho-c-Kit (Tyr719) Antibody20 ul
小鼠磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)分析檢測試劑盒Phospho-c-Kit (Tyr719) Antibody100 ul
小鼠可溶性瘦素受體(sLR)分析檢測試劑盒RYBP Antibody100 ul
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP2/Gel A)抗體分析檢測試劑盒c-Kit Antibody100 ul
小鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)分析檢測試劑盒JMJD2A (C70G6) Rabbit mAb100 ul
小鼠紅細胞生成素(EPO)分析檢測試劑盒SWAP70 (D5O6A) Rabbit mAb100 ul
小鼠骨形成蛋白(BMPs)分析檢測試劑盒NHERF1 (A310) Antibody1 Kit
小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)分析檢測試劑盒Branched Ubiquitin Antibody Sampler Kit100 ul
小鼠雌三醇(E3)分析檢測試劑盒LRP6 (C47E12) Rabbit mAb20 ul
小鼠層連蛋白/板層素(LN)分析檢測試劑盒LRP6 (C47E12) Rabbit mAb100 ul
小鼠S100-B蛋白(S100B)分析檢測試劑盒TCF8/ZEB1 (D80D3) Rabbit mAb20 ul
小鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)分析檢測試劑盒TCF8/ZEB1 (D80D3) Rabbit mAb100 ul
小鼠CXC趨化因子配體1(CXCL1)分析檢測試劑盒SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb20 ul
ATTO 465Ganoderma│applanatum (Pers.) Pat.分離基物: 子實體斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 28存儲條件: 定期移植法
Halomonas│sp.分離基物: 沉積物/深海沉積物凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 1.海洋石油污染生物修復(fù); 4.生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Penicillium│simplicissimum分離基物: 土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Stenotrophomonas│maltophilia凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)淀粉酶培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 60℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Sorangium│cellulosum分離基物: 土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 作為粘細菌聚酮合酶的的基因篩選庫,分析和篩選聚酮基因的多樣性培養(yǎng)基: 844生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Tsukamurella│sp.分離基物: 沉積物/表層沉積物凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的有機污染物降解菌/分離自十溴聯(lián)醚富集菌群培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Staphylococcus│aureus分離基物: 患病奶牛凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Idiomarina│loihiensis分離基物: 水樣/上層海水斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: potential antifouling 潛在的抗污損活性培養(yǎng)基: 469生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Aspergillus│sulphureus凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法