商品介紹:
測定意義 氮素是構(gòu)成生物體的一種必需元素,自然界中的氮素循環(huán)包括許多轉(zhuǎn)化作用。空氣中的氮?dú)獗还痰⑸锛爸参锱c微生物的共生體固定成氨態(tài)氮,經(jīng)過硝化微生物的作用轉(zhuǎn)化成硝態(tài)氮,后者被植物或微生物同化成有機(jī)氮化物,植物組織氨氮含量可反映植物受脅迫的程度。 測定原理 銨態(tài)氮在強(qiáng)堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚藍(lán),在625nm處有特征吸收峰,吸光值與銨態(tài)氮含量成正比。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、常溫離心機(jī)、分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
商品屬性:
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
奧唑磺酰化物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Glipizide癌胚抗原相關(guān)粘附分子1抗體包裝500ml
奧唑鎂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Donepezil HCl趨化樣因子受體1抗體包裝1g
奧唑鈉一合物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Estrone造血干抗原CD133抗體包裝1g
奧沙坦酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: EstroneG蛋白偶聯(lián)受體相互作用蛋白1抗體(補(bǔ)體Clq TNF相關(guān)蛋白1)包裝250mg
奧沙秦鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Clindamycin HCl心肌營養(yǎng)1抗體包裝5g
奧沙鉑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Clindamycin HClC型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體包裝5g
奧沙普秦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Verapamil HCl陽離子通道相關(guān)蛋白β亞基抗體包裝1g
奧硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Verapamil HCl特異性蛋白57抗體包裝250mg
奧扎格雷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Mycophenolic acidL選擇抗體包裝1g
奧扎格雷鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Mycophenolic acidCD53抗體包裝25g
巴丁 III(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Amoxicillin 死亡同源蛋白6抗體包裝5g
巴柳氮鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Amoxicillin 離子通道KB抗體包裝25g
巴龍霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: FenofibrateC型凝集結(jié)構(gòu)域家族12成員A抗體包裝5g
巴芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fenofibrate離子通道蛋白2抗體包裝1g
巴芬雜質(zhì)A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: ProbenecidC型凝集結(jié)構(gòu)域家族9成員A抗體包裝25mg
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:≥630µg/mg,BR,可用于培養(yǎng)血管內(nèi)皮生長因子試劑盒新芒果苷;neomangiferin
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR血管內(nèi)皮生長因子受體1試劑盒香紫蘇內(nèi)酯;clareolide
17507=AS1.3432=JCM12465=T3-B9資源名稱: 太湖新鞘菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品血管內(nèi)皮生長因子121試劑盒香草;Vanillic acid
植物銨態(tài)氮測試盒50管/48樣黑曲霉 蛙皮精Elisa
擬盤多毛孢屬 5-溴苊流行性出血熱Elisa
紅菇 順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸甲酯甘膽酸抗體Elisa
Pseudomonas guariconensis 2,4-二甲氧基苯硫氧還蛋白還原Elisa
糙皮側(cè)耳 -反式-1,2-環(huán)己二乙脫氫7Elisa
產(chǎn)紅青霉 正辛基 α-D-葡萄糖苷C多肽Elisa
聚生殼 3-硝基對核糖體S6激Elisa
豹斑鵝膏 4-O-(β-吡喃半乳糖)-D-吡喃甘露糖苷曲霉Elisa
釀酒酵母 3-甲氧基苯乙組三聚體核苷結(jié)合蛋白2Elisa
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 α-槐糖 單水合物總1型膠原氨基端延長肽Elisa
臭紅菇 L-3-苯乳酸羥甲基戊二酰合Elisa
水稻黃單胞(水稻白葉枯)* 2-溴-4-氟-1-苯,高遷移率族蛋白Elisa
康寧木霉 氨基六甘單甲醌氧化還原1Elisa
玫瑰考克氏 Bradykinin Fragment 2-9巨病IgA抗體Elisa
成團(tuán)泛 亞磺酸鈉蛋白質(zhì)羧基Elisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。