精子核蛋白染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：豚鼠死亡相關(guān)蛋白6(DAP6)試劑盒Anti-NBN Antibody(0651)鋅指蛋白750抗體
豚鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)試劑盒Anti-NCF1 Antibody鋅指蛋白744抗體
豚鼠生長(zhǎng)2(GH2)試劑盒Anti-NCKAP1 Antibody鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8蛋白抗體
豚鼠著絲粒蛋白A(CENPA)試劑盒 Anti-NCL Antibody鋅指蛋白85

產(chǎn)品分類：細(xì)胞染色

儲(chǔ)存條件：4℃,避光,12個(gè)月

用途：主要用于成年男子精子核組蛋白成熟度的染色，可評(píng)價(jià)男性生育功能。

注意事項(xiàng)：精子產(chǎn)生成熟過(guò)程中，與精核DNA結(jié)合的堿性蛋白發(fā)生組型轉(zhuǎn)換，富含賴氨酸殘基的組蛋白逐漸被富含精氨酸和胱氨酸殘基的精核蛋白所取代。酸性條件下，苯胺藍(lán)與賴氨酸殘基結(jié)合生成藍(lán)色或紫藍(lán)色化合物，從而指示富含賴氨酸殘基蛋白質(zhì)的存在，而核蛋白成熟的精子不被染色，如用伊紅復(fù)染則核蛋白成熟的精子為紅色。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

去氫土莫 DBD-ED [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(2-aminoethylamino)-2,1,3-benzoxadiazole] 鳥(niǎo)苷環(huán)化激活蛋白2抗體包裝100ml

去亞基小檗堿（標(biāo)準(zhǔn)品） AABD-SH (=4-Acetamido-7-mercapto-2,1,3-benzoxadiazole) 鳥(niǎo)苷環(huán)化激活蛋白3抗體包裝25g

去氧紫草(標(biāo)準(zhǔn)品) 9-(Bromomethyl)acridine 基合成抗體包裝5g

去乙酰車葉草酯（標(biāo)準(zhǔn)品） DBD-COCl [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(N-chloroformylmethyl-N-methylamino)-2,1,3-benzoxadiazole]高爾基體卷曲螺旋蛋白1抗體包裝1g

全蝎（標(biāo)準(zhǔn)品） NBD-COCl [=4-(N-Chloroformylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole] 高爾基體卷曲螺旋蛋白2抗體包裝250mg

全葉青蘭（標(biāo)準(zhǔn)品） o-Phthalaldehyde 戊二酰脫氫抗體包裝5g

拳參（標(biāo)準(zhǔn)品） Dansyl HydrazineGTP環(huán)反饋調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5mg

染料木苷（標(biāo)準(zhǔn)品） DBD-H [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-hydrazino-2,1,3-benzoxadiazole] 絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2抗體包裝25g

染料木/金雀異黃(標(biāo)準(zhǔn)品） NBD-H (=4-Hydrazino-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole Hydrazine) 廣泛控制基合成1樣蛋白1抗體包裝5g

人參（標(biāo)準(zhǔn)品） 1,3-Cyclohexanedioneβ1-6 N-乙?；咸烟寝D(zhuǎn)移2抗體包裝250mg

人參二(標(biāo)準(zhǔn)品) ABD-F [=4-(Aminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]磷化G蛋白激活內(nèi)向通道1抗體包裝100g

人參莖葉（標(biāo)準(zhǔn)品） Ferroceneacetic AcidG蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白2抗體包裝25g

人參蘆頭（標(biāo)準(zhǔn)品） (Hydrazinocarbonyl)ferrocene間隙連接蛋白10抗體包裝500g

人參三(標(biāo)準(zhǔn)品) Dimethyl Sulfoxide間隙連結(jié)蛋白46/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體包裝1g

人參皂苷CK(標(biāo)準(zhǔn)品) 1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene間隙連結(jié)蛋白50/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體包裝25g

鐮孢Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品尿微量白蛋白試劑盒羅漢果苷III;Mogroside II

棒形小克銀漢霉Cunninghamella│clavata 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP grade尿相關(guān)蛋白C試劑盒律草;Humulone

ATCC44166=DSM2191資源名稱: 米根霉 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品尿皮龍膽;2,5-Dihydroxyben
精子核蛋白染色液Podoplanin Protein  平足蛋白抗原規(guī)格： 0.5mg

Pokemon (POK Erythroid Myeloid Ontogenic factor)  “撲克蒙"蛋白又稱“波克曼"蛋白規(guī)格： 0.5mg

Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1)  多囊腎蛋白1抗原規(guī)格： 0.5mg

Polycystin 2(polycystic kidney disease 2)  多囊腎蛋白2規(guī)格： 0.5mg

phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide  磷suan化蛋白激meiB抗原（絲氨suan磷suan化位點(diǎn)：473）規(guī)格： 0.5mg