鹽酸乙醇胺溶液公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：Anti-Phospho SHB (Tyr246) Antibody大鼠熱休克蛋白60
Anti-Phospho SLC6A3 (DAT) (Thr53) Antibody小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2
Anti-Phospho SLC6A4 (Thr276) Antibody小鼠熱休克蛋白90
Anti-Phospho SNCA (Ser129) Antibody人S

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢(xún)并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類(lèi)：DNA溶液

儲(chǔ)存條件：室溫,6個(gè)月

用途：制備DNA親和介質(zhì)

注意事項(xiàng)：無(wú)菌溶液,過(guò)濾除菌。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn)，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

橢圓釀酒酵母抗體Human PPIL6 ELISA Kit血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1)

空泡鹽紅菌7抗體Human PPAT ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)

黑曲霉9抗體（舒血管9）Human PPM1A ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)

大腸埃希菌14抗體Human PPCS ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)

側(cè)孢短芽胞桿菌電壓閥門(mén)通道混合器相關(guān)亞家族成員7抗體Human PPEF1 ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR1)

淡紫擬青霉ATP敏感性通道亞基kir6.2抗體Human PPM1B ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子E(VEGF-E)

小平菇（秀珍菇）TIP60抗體Human PPM1F ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)

根瘤菌組蛋白賴(lài)特異性脫甲基1抗體Human PPP1CB ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)

豌豆根瘤菌轉(zhuǎn)錄因子GATA3結(jié)合蛋白G3B抗體Human PPM1G ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)

大腸桿菌磷化周期蛋白依賴(lài)激抑制因子1C抗體Human PPID ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGF-A)

吸水鏈霉菌磷化通道蛋白DRK1抗體Human POU3F3 ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF165)

熱帶假絲酵母離子通道蛋白Kv3.4抗體Human POLR3A ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)

頂孢霉離子通道蛋白Kv3.3抗體Human POLR3D ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR3/Flt4)

鐘器腐霉組蛋白去甲基化JMJD2B抗體Human POLR3B ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)

嗜熱脂環(huán)芽胞桿菌肝果糖激抗體Human POU3F4 ELISA Kit血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子121(VEGF121)

鬼傘脊柱側(cè)后凸畸形肽抗體Human POU4F2 ELISA Kit血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)

植物乳桿菌Lactobacillus│plantarum 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)續(xù)隨二萜

ATCC700850=DSM11927資源名稱(chēng): 方形鹽盒菌 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)(T)石榴皮鞣
鹽酸乙醇胺溶液Mouse Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit  小鼠乳suan脫氫mei規(guī)格： 48T

Mouse red cell antibody ELISA Kit   小鼠抗紅細(xì)胞規(guī)格： 48T

Mouse carcinoembryonic antign,CEA ELISA Kit   小鼠癌胚抗原規(guī)格： 48T

Mouse Cluster of differentiation 19,CD19 ELISA Kit  小鼠CD19分子規(guī)格： 48T

Mouse Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit  小鼠CD3分子規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn)，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線(xiàn)的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應(yīng)曲線(xiàn)）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀(guān)察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。