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丙酮酸羧化酶(PC)測(cè)試盒100管/96樣

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更新時(shí)間:2022-06-20 14:00:12瀏覽次數(shù):256

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
貨號(hào) AS6321376 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 檢測(cè)方法 微量法
丙酮酸羧化酶(PC)測(cè)試盒100管/96樣公司正在銷售的產(chǎn)品:兔磷TRAP-5b ELISA試劑盒Anti-NEDD4 Antibody 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β激蛋白22(TSC22)elisa定量檢測(cè)試劑盒
人白共同抗原Anti-NEFL Antibody人磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)elisa定量檢測(cè)試劑盒
兔子可溶性CD40配體Anti-NEFM Antibody人鳥氨脫羧(ODC)elisa定量

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅供科研使用:

產(chǎn)品名稱

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

丙酮酸羧化酶(PC)測(cè)試盒100管/96樣

微量法

100管/96樣

AS6321376

商品介紹:

商品介紹

 測(cè)定意義:

丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC,EC 6.4.1.1)廣泛存在于動(dòng)物、霉菌和酵母的線粒體中,催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,是糖異生過(guò)程的第一個(gè)限速酶,在保證血糖的動(dòng)態(tài)平衡方面起著重要的作用。

測(cè)定原理:

PC催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,蘋果酸脫氫酶進(jìn)一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm下測(cè)定NADH氧化速率,即可反映PC活性

需自備的儀器和用品:

分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

常見(jiàn)樣本處理方法:

1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。

2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。

2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。

3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍

4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

測(cè)定步驟:

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣,不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

平菇胰輔脂抗體Human HCCS(Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit人羥甲基戊二單酰還原(HMG-CoAR)免疫試劑盒

螺卷毛殼19號(hào)染色體開放閱讀框45抗體Human HDAC2(Histone Deacetylase 2) ELISA Kit人羥甲基戊二單酰(HMG-CoA)免疫試劑盒

鮮綠青霉過(guò)氧化氫誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體Human GSTα4(Glutathione S Transferase Alpha 4) ELISA Kit人羥基賴正己(HLNL)免疫試劑盒

釀酒酵母核因子NFκB激活蛋白1抗體Human Hepc(Hepcidin) ELISA Kit人羥脯(Hyp)免疫試劑盒

米曲霉第12號(hào)染色體開放閱讀框23抗體Human GSK3α(Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha) ELISA Kit人強(qiáng)啡肽(Dyn)免疫試劑盒

釀酒酵母γ-連環(huán)/連接蛋白γ抗體Human GSP(Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit人潛伏轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β結(jié)合蛋白2(LTBP2)免疫試劑盒

日勾維腸桿菌10號(hào)染色體開放閱讀框4抗體Human GSTα1(Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit人潛伏膜蛋白1(LMP-1)免疫試劑盒

中國(guó)克魯維酵母10號(hào)染色體開放閱讀框47抗體Human GPI(Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit人前心鈉肽(Pro-ANP)免疫試劑盒

黃色短桿菌10號(hào)染色體開放閱讀框81抗體Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人前纖維蛋白1抗體免疫試劑盒

猴頭菌19號(hào)染色體開放閱讀框47抗體Human GPRC5A(G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit人前纖維蛋白1免疫試劑盒

金黃殼囊孢19號(hào)染色體開放閱讀框54抗體Human GPR37(G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit人前鐵調(diào)(Pro-Hepc)免疫試劑盒

貝雷絲孢酵母N-乙酰半乳糖糖蛋白3、β-半乳糖轉(zhuǎn)移1抗體Human GR(Glutathione Reductase) ELISA Kit人前列腺性磷(PAP)免疫試劑盒

球孢白僵菌19號(hào)染色體開放閱讀框18抗體Human GIF(Gastric Intrinsic Factor) ELISA Kit人前列腺H2(PGH2)免疫試劑盒

總狀毛霉19號(hào)染色體開放閱讀框21抗體Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人前列腺F2α(PGF2α)免疫試劑盒

沼澤紅假單胞菌19號(hào)染色體開放閱讀框24抗體Human GLDL(Glycated Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人前列腺F(PGF)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體Human GJβ1(Gap Junction Protein Beta 1) ELISA Kit人前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒

葡萄穗霉屬Stachybotrys│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRB連接蛋白試劑盒橙花

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRB活化因子受體試劑盒長(zhǎng)梗秦艽

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRB活化因子試劑盒常山乙
丙酮酸羧化酶(PC)測(cè)試盒100管/96樣史氏芽孢桿 2,5-二苯肼鹽酸鹽磷酸化鈣調(diào)依賴性蛋白激2Elisa

Erwinia persicina  2-溴苯肼鹽酸鹽紅生成受體Elisa

頭狀莖點(diǎn)霉 5-氨基-2-甲輕脂酞輔脫氫Elisa

金針菇 Dichlorobis(2-(二苯基膦)乙)釕(II)ATP合成Elisa

頂黑毛殼 4-溴-2,3-二甲核因子κB抑制物激Elisa

出芽短梗霉(黑酵母) 花生酸舒緩激肽Elisa

大豆慢生根瘤 花生酸痢疾密螺旋體Elisa

釀酒酵母 2,凝血原Elisa

檸檬兩面神 5-氟-2-缺氧誘導(dǎo)因子Elisa

米根霉 高哌唾液淀粉α1Elisa

枯草芽孢桿 10-溴癸酸IIA分泌型磷脂A2Elisa

健康皮張抗原(兔皮A) 2,4,6-三氟異酸苯酯煙酰腺二核苷酸Elisa

鎖擲酵母 3-氟-4-(甲氧基羰基)苯酸20-羥化二十碳四烯酸Elisa

釀酒酵母 2-溴-5-(三氟甲基)吡啶糖原合成激3Elisa

陰溝腸桿 4-氨基肉桂酸乙酯巨噬來(lái)源的趨化因子22Elisa

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。


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