硬組織線粒體分離試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品：兔酮酸脫氫酶激酶同工酶4(PDK4)試劑盒Anti-GIP AntibodySPOP蛋白抗體
兔轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)試劑盒Anti-GJA1 Antibody鈉離子/?；悄懰峁厕D(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體
兔蛋白二硫化物異構(gòu)酶A2(PDIA2)試劑盒Anti-GJA4 Antibody生長(zhǎng)抑素14抗體
兔谷脫羧酶2(GAD2)試劑盒Anti-GJA3 Antibod

產(chǎn)品分類：細(xì)胞組分分離

儲(chǔ)存條件：—20℃,12個(gè)月

用途：適用于快速?gòu)膭?dòng)物硬組織(心肌、骨骼肌)或其他難以分離線粒體的組織中提取線粒體。

注意事項(xiàng)：采用梯度離心法分離線粒體外膜和內(nèi)膜以及基質(zhì)膜,大部分獲得的線粒體都含有完整的內(nèi)膜和外膜

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

磺加貝酯（標(biāo)準(zhǔn)品） Glimepiride鈣粘附蛋白8抗體包裝1g

磺羅哌（標(biāo)準(zhǔn)品） Griseofulvin;Fulcin6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框174抗體包裝5g

磺帕珠沙星（標(biāo)準(zhǔn)品） Griseofulvin6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框150抗體包裝25g

磺培沙星（標(biāo)準(zhǔn)品） Sodium hyaluronateX染色體開(kāi)放閱讀框56抗體包裝5g

磺齊西（標(biāo)準(zhǔn)品） Hydrocortisone9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框152抗體包裝25g

磺（標(biāo)準(zhǔn)品） Hydrocortisone6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框58抗體包裝5g

基斑蝥（標(biāo)準(zhǔn)品） Ibutilide fumarate 接觸蛋白相關(guān)蛋白4抗體包裝1g

基丁香（標(biāo)準(zhǔn)品） Ibutilide fumarate CD24抗體包裝1g

基原(標(biāo)準(zhǔn)品) Isepamicine Sulphate接觸蛋白相關(guān)蛋白3抗體包裝100g

硫二馬(標(biāo)準(zhǔn)品) BexaroteneCD24抗體包裝25g

硫新斯的明(標(biāo)準(zhǔn)品) Bexarotene限局性核因子3抗體包裝1g

巰咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Ketoprofen胰羧肽A6抗體包裝250mg

巰咪唑（標(biāo)準(zhǔn)品） Ketoprofen9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框150抗體包裝5g

硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Ketotifen fumarate鈣粘附蛋白9抗體包裝1g

硝唑雜質(zhì)A（2-基-5-硝基咪唑）標(biāo)準(zhǔn)品 Ketotifen fumarate鈣粘蛋白15抗體包裝5g

AS3.951資源名稱: 米曲霉 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP腺苷環(huán)化1試劑盒五味子乙;Schisandrin B

: 75-049資源名稱: O1群霍亂弧菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2試劑盒土克甾;Turkesterone

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP32腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1試劑盒土貝母皂苷乙;TubeiMoside I
硬組織線粒體分離試劑盒OPGL/RANKL/CD254 /FITC  熒光標(biāo)記骨保護(hù)蛋白配體IgG AR,98.0%

RANK/TNFRSF11A/CD265/FITC  熒光標(biāo)記核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體IgG高 AR

OPN/FITC  熒光標(biāo)記骨橋蛋白IgG偶氮胭脂紅B Biological stain

OPN/FITC  熒光標(biāo)記骨橋蛋白IgG化鉍 AR

ORX-A/FITC  熒光標(biāo)記增食欲-A/欲激AIgG化鉍 CP

Osx /FITC  熒光標(biāo)記成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子IgG化鉍 99.99% metals basis，無(wú)水級(jí)

Os05g/0477200 protein /FITC  熒光標(biāo)記抗水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白IgG化鉍 99.999% metals basis，無(wú)水級(jí)

OTR/FITC  熒光標(biāo)記縮宮受體IgG二苯磺鋇 CP