MS無(wú)機(jī)大量元素母液公司正在銷售的產(chǎn)品：兔谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶κ1(GSTκ1)試劑盒Anti-DHX15 Antibody減數(shù)分裂重組蛋白家族REC8抗體
兔11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)試劑盒 Anti-DICER1 Antibody視黃脫氫酶2型抗體
兔過(guò)氧化還原酶1(PRDX1)試劑盒Anti-DIO1 Antibody再生基因蛋白4抗體
兔胱抑素C(Cys-C)試劑盒Anti-D

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件：4℃,6個(gè)月

用途：主要用于配制MS培養(yǎng)基，植物組織培養(yǎng)

注意事項(xiàng)：無(wú)菌溶液。硝酸an、硝酸鉀、氯化鈣、硫酸鎂、磷酸鹽組成，該試劑經(jīng)無(wú)菌處理，稀釋至1×使用。每100ml溶液可制備2000ml培養(yǎng)基，配制好的1×工作液其氯化鈣濃度為0.332g/L、硝酸an濃度為1.65g/L

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

AMPA離子能谷受體3(GRIA3)GRIA3 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框122抗體包裝1g

AMPA離子能谷受體2(GRIA2)GRIA2 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框123抗體包裝5g

ADP核糖轉(zhuǎn)移1(ART1)ART1 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框124抗體包裝25g

Ⅻ型膠原(COL12)COL12 ELISA Kit2號(hào)染色體開放閱讀框3抗體包裝5g

Ⅹ型膠原(COL10)COL10 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框127抗體包裝25g

ⅩⅤ型膠原(COL15)COL15 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框129抗體包裝5g

Ⅶ型膠原(COL7)COL7 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框130抗體包裝25g

Ⅵ型膠原α1(COL6α1)COL6α1 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框131抗體包裝5g

Ⅴ型膠原α2(COL5α2)COL5α2 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框135抗體包裝5g

Ⅳ型膠原α1(COL4α1)COL4α1 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框141抗體包裝100ml

Ⅳ型膠原(COL4)COL4 ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框144抗體包裝25ml

Ⅲ型前膠原基端原肽(PⅢNP)PⅢNP ELISA KitCOPA蛋白抗體包裝1g

Ⅲ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅢ)CTXⅢ ELISA Kit1號(hào)染色體開放閱讀框185抗體包裝5g

Ⅲ型膠原(COL3)COL3 ELISA Kit磷化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體包裝1g

Ⅱ型前膠原羧基端原肽(PⅡCP)PⅡCP ELISA Kit磷化α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體包裝250mg

小舟單頂孢Monacrosporium│microscaphoides 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR,可用于培養(yǎng)乙脫氫18家族成員A1試劑盒8-O-乙酰山梔苷酯;8-O-acet

立枯絲核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品乙脫氫試劑盒鴨腳樹葉堿;2α,5α-Epoxy-1,

黃綠蜜環(huán)菌Armillaria│mellea 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR乙基二異鼠李-3-O-葡萄糖苷;Isorha
MS無(wú)機(jī)大量元素母液KLK9/FITC  熒光標(biāo)記9IgG  98%

KLK/FITC  熒光標(biāo)記IgG(3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-氧)三-1-吡咯烷六氟鹽  

KLK14/FITC  熒光標(biāo)記14IgG7-氮雜苯并三唑-1-氧三(二)膦六氟鹽 98%

KLRF1/NKp80/FITC  熒光標(biāo)記性受體NK-p80IgG2-(7-氮雜苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲四氟鹽  98%

K-ras/FITC  熒光標(biāo)記原癌因K-rasIgG卡特縮合劑 98%

KT3 tag/FITC  熒光標(biāo)記KT3 tag標(biāo)簽IgG2-溴-1-吡啶四氟鹽 98%

KT3 tag/HRP  辣根過(guò)氧化物標(biāo)記KT3 tag標(biāo)簽IgG雙（2-氧代-3-惡唑烷）酰 97%

KCNA5/FITC  熒光標(biāo)記通道混合相關(guān)蛋白亞型5IgG(苯并三唑-1-)-N,N,N',N'-二吡咯脲六氟酯 98%

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。