異硫氰酸胍溶液公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-PLXDC1 Antibody人腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子
Anti-PMCH Antibody人色素上皮衍生因子
Anti-PLXNC1 Antibody小鼠性結(jié)合球蛋白
Anti-PMS2CL Antibody人白介素23
Anti-PNKP Antibody小鼠脫氫表雄酮S7
Anti-PMEPA1 Antibody人克拉拉蛋白
Anti-PN

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：核酸提取

儲(chǔ)存條件：室溫,12個(gè)月

用途：蛋白質(zhì)變性,提取RNA

注意事項(xiàng)：主要由異硫氰酸胍、DEPC處理水組成。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

赭鱗蘑菇溶菌抗體Human PEX7 ELISA Kit維生A(VA)

產(chǎn)氣腸桿菌蚓激抗體Human TNMD(Tenomodulin) ELISA Kit微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)

簇生黃韌傘瘦抗體Human PFDN4 ELISA Kit微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)

粉紅單端孢瘦受體抗體Human PFDN5 ELISA Kit微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)

灰樹花瘦受體抗體（長）Human PFKFB2 ELISA Kit微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3A(MAP1LC3A)

大腸埃希氏桿菌晚期包膜蛋白1抗體Human PGAP1(Post-GPI attachment to proteins factor 1) ELISA Kit微管微絲交聯(lián)因子1(MACF1)

華麗側(cè)耳（佛羅里達(dá)側(cè)耳）富含亮樣性核蛋白抗體Human PFKFB3 ELISA Kit微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(ABCC3)

蘑菇晚期包膜蛋白2B抗體Human PEX5 ELISA Kit微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(ABCC2)

紅冬孢酵母脂肪家庭成員K抗體Human PEX5L ELISA Kit網(wǎng)膜(omentin)

 寇氏隱甲藻白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18抗體Human PFTK1 ELISA Kit晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)

三葉草根瘤菌無腦回的致病基因LIS1抗體Human PEX7 ELISA Kit晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)

大腸埃希氏菌溶體相關(guān)膜蛋白3抗體Human PFDN1 ELISA Kit晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)

靈芝亮腦啡肽抗體Human PFDN4 ELISA Kit外顯肽(extein)

腸膜明串珠菌自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體Human TNMD(Tenomodulin) ELISA Kit蛙皮(BBS)

假單胞菌指甲髕骨綜合征相關(guān)蛋白NPS1抗體Human PFDN5 ELISA Kit唾液(SA)

易脆毛霉自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈β3抗體Human PES1 ELISA Kit唾液過氧化物(SP)

JCM13563資源名稱: 棲污泥鹽土生古菌 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)常春藤皂苷B

蚜蟲擬酵母Pseudozyma│aphidis 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)竹節(jié)香附A

海底嗜冷桿菌Psychrobacter│submarinus 質(zhì)量規(guī)格：用于配位滴定銅時(shí)的指示劑五加苷E
異硫氰酸胍溶液MECF(ouse eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit  小鼠嗜suan粒細(xì)胞趨化因子規(guī)格： 48T

Eotaxin 1/CCL11(Mouse Eotaxin 1) ELISA Kit  小鼠嗜suan粒細(xì)胞趨化蛋白規(guī)格： 48T

E-Selectin/CD62E(Mouse E-Selectin) ELISA kit  小鼠E選擇su規(guī)格： 48T

FAS/CD95(Mouse Factor-related Apoptosis) ELISA Kit  小鼠凋亡相關(guān)因子規(guī)格： 48T

Mouse Slit2 ELISA Kit   小鼠Slit2規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。