乙酸緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品：維生suD4(VD4)試劑盒Anti-OR1D5 Antibody小鼠孤腓肽
維生suVE)試劑盒Anti-OR1L6 Antibody大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑
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亮腦啡肽(LEK)試劑盒Ant

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產(chǎn)品分類：免疫組化

儲(chǔ)存條件：室溫,12個(gè)月  

用途：蛋白A-瓊脂糖進(jìn)行單克隆抗體的純化

注意事項(xiàng)：主要由0.05mol/L乙酸鈉、0.15mol/L氯化鈉組成,乙酸調(diào)pH4.3。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

總狀毛霉單甲基組蛋白H3K9抗體Human SP110 ELISA Kit大鼠補(bǔ)體AH50 免疫試劑盒

青色糖單孢菌HDHD2B蛋白抗體Human ACTN3(Alpha-actinin-3) ELISA Kit大鼠波形蛋白(VIM)免疫試劑盒

暗色節(jié)菱孢*造血干特異性相關(guān)結(jié)合蛋白1抗體Human SOX13 ELISA Kit大鼠激M2型同工(M2-PK)免疫試劑盒

豇豆慢生根瘤菌I類組織相容性H-2抗原D-Dalpha鏈抗體Human SP2 ELISA Kit大鼠二單酰脫羧(MLYCD)免疫試劑盒

橙色桿狀菌HEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白5A蛋白抗體Human SODD/BAG4 ELISA Kit大鼠二單酰(malonyl CoA)免疫試劑盒

印度毛殼熱休克蛋白70抗體Human SOCS6 ELISA Kit大鼠二(MDA)免疫試劑盒

草木樨中華根瘤菌羥類固脫氫17β抗體（17β-HSD8）Human AQPEP(Aminopeptidase Q) ELISA Kit大鼠基轉(zhuǎn)移(ALT)免疫試劑盒

牧草紅酵母透明質(zhì)結(jié)合蛋白4抗體Human Sodium iodide symporter ELISA Kit大鼠別孕烯/3α,5α-四氫孕(AP/3α,5α-THP)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌A型流感病H5N1凝集抗體Human SORBS2 ELISA Kit大鼠表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)免疫試劑盒

光滑青霉A型流感病核衣殼蛋白抗體Human SNRPD3 ELISA Kit大鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)免疫試劑盒

土曲霉原變種A型流感病核衣殼蛋白抗體Human ACTN3(Alpha-actinin-3) ELISA Kit大鼠胞外銅鋅超氧化物歧化(Cu/Zn-SOD/SOD3)免疫試劑盒

秀珍菇A型流感病核衣殼蛋白抗體Human SP2 ELISA Kit大鼠胞漿型磷脂A2(cPLA2)免疫試劑盒

耶爾森氏菌屬B型流感病蛋白抗體Human SOX12 ELISA Kit大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)免疫試劑盒

腸道致病性大腸埃希氏菌人類狀瘤病16-E7抗體Human SNX7 ELISA Kit大鼠半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)免疫試劑盒

亞羅酵母屬跨膜蛋白絲1抗體Human SOAT2 ELISA Kit大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒

肺癌癌基因蛋白3抗體Human SOCS5 ELISA Kit大鼠白血病抑制因子(LIF)免疫試劑盒

AS1.251資源名稱: 枯草芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品草質(zhì)

史氏芽孢桿菌Bacillus│smithii 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC)百蕊草I

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%（GC)硫金雀花堿
乙酸緩沖液EL ELISA Kit  大鼠內(nèi)皮脂肪mei規(guī)格： 48T

CA ELISA Kit  大鼠碳suan酐mei規(guī)格： 48T

CGRP ELISA Kit  大鼠降鈣su基因相關(guān)肽規(guī)格： 48T

MTL ELISA Kit  大鼠胃動(dòng)su規(guī)格： 48T

Beta-EP ELISA Kit  大鼠β內(nèi)啡肽規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。