詳細(xì)介紹
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 脂肪醛脫氫酶抗體 |
英文名稱 | ALDH3A2 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
DL氨;蛋氨 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥98%
DL天冬氨 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥98%
DL谷氨酰 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:97%
DL脯氨 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:0.99純度:≥95%
DL丙氨鹽鹽 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥95%
L谷氨5乙 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:0.985純度:≥98%
N乙酰DL亮氨 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥98%
N碳芐氧基賴氨,N6CbzL賴氨 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:98%,BR純度:98%
鹽艾司洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:98%
鹽艾司洛爾 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥97%
HMetOtBu.HCL 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥99%
麥芽糖 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%純度:≥98%
L蘇氨鹽鹽 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥98%
N乙酰L色氨乙 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:HPLC>98%,BR純度:≥98%
N乙酰DL色氨 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥98%
N酰DL色氨 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:≥98%
ALOXE3 表皮型脂氧合酶3一抗(魚鱗病相關(guān)蛋白) * 0.2ml Protamine sulfate from Salmom
ALPK3 α蛋白激酶3一抗(心肌) * 0.2ml BCIP, disodium salt
CEND1 細(xì)胞周期通道和神經(jīng)細(xì)胞分化蛋白1一抗 * 0.2ml Copper(II) acetate, hydrate
DHRS9 短鏈脫酶/還原酶家族9一抗 * 0.2ml Creatine phosphate
DLL3 tch信號(hào)通路Delta樣配體3一抗 * 0.2ml Fructose 1,6bisphosphate, 3sodium salt
EME1 減數(shù)分裂內(nèi)切酶EME1一抗 * 0.2ml Fructose 1,6bisphosphate,3sodium salt
FAM3C/ILEI 上皮分泌型FAM3C蛋白一抗 * 0.2ml LAmmonium tartrate
FSTL5 卵泡抑素相關(guān)蛋白5一抗 * 0.2ml Potassium carbonate, anhydrate
脂肪醛脫氫酶抗體Pestalotiopsis clavispora分離基物: 紅樹枝(內(nèi)生)提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法
Alternaria sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗癌活性培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 28C存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥
Chaetomium gracile分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 26C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
Thermoanaerobacter ethanlicus分離基物: 油層水提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 三價(jià)鐵還原培養(yǎng)基: 0491生長(zhǎng)條件: 65℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Escherichia coli分離基物: 腹瀉仔豬糞便提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研及血清定型培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;
Colletotrichum coccodes提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 20℃
Clostridium botulinum Type C分離基物: 肉毒中毒山羊肝提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研及血清定型培養(yǎng)基: 54生長(zhǎng)條件: 35存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;
Rhizobium sp.分離基物: 降香黃檀3年生苗(海南檀)根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 固氮培養(yǎng)基: 63生長(zhǎng)條件: 28-30存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Rubulavirus Newcastle disease virus分離基物: 病雞提供形式: 凍結(jié)物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 實(shí)驗(yàn)研究其生物學(xué)活性,并進(jìn)一步從基因水平上進(jìn)行分析。同時(shí),篩選合適的疫苗毒株制備新型疫苗。培養(yǎng)基: 0生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;