詳細(xì)介紹
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:N-BOC-乙二胺
貨號(hào):FSP153
產(chǎn)品規(guī)格:5 g/25 g
分類:熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
大鼠角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)Phospho-IRS-1 (Ser332/336) Antibody100 ul
小鼠胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基價(jià)格Phospho-PP1α (Thr320) Antibody100 ul
小鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)SPAR (D9P9T) Rabbit mAb100 ul
4-(E)-2-(3,5-二羥基基)乙烯基-1,3-二醇29700-22-9*PP1α Antibody100 ul
薯蕷次苷A19057-67-1*GLI2 (R770) Antibody100 ul
白麻苷18609-17-1實(shí)驗(yàn)方法IGFBP3 (D1U9C) Rabbit mAb100 ul
左旋千金藤啶堿16562-13-3價(jià)格PCNA (PC10) Mouse mAb20 ul
阿魏酸1135-24-6實(shí)驗(yàn)步驟PCNA (PC10) Mouse mAb100 ul
表沒食子兒茶素970-74-1實(shí)驗(yàn)方法TORC1/CRTC1 (C71D11) Rabbit mAb100 ul
大豆苷552-66-9 價(jià)格DLL1 Antibody20 ul
丹參酚酸B甲酯122021-74-3價(jià)格DLL1 Antibody100 ul
靛玉紅479-41-4實(shí)驗(yàn)方法DLL4 Antibody20 ul
番瀉苷D37271-17-3價(jià)格DLL4 Antibody100 ul
胡椒堿94-62-2價(jià)格SirT6 Antibody100 ul
芥子堿硫酸鹽 7431-77-8實(shí)驗(yàn)步驟Myoglobin (D2F5X) Rabbit mAb100 ul
花青素528-58-5實(shí)驗(yàn)步驟Acetyl-Histone H4 (Lys12) Antibody100 ul
芒柄花黃素485-72-3 *Histone H4 Antibody100 ul
N-BOC-乙二胺Streptomyces│sp.分離基物: 表面土壤其他安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)及微生物藥物學(xué)的研究培養(yǎng)基: 12生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 其他
Monilinia│fructigena Honey分離基物: 自然發(fā)病果斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 22-25存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Aspergillus│oryzae分離基物: 酒曲凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 酒精糖化用。培養(yǎng)基: CM0085生長條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Enterobacter│aerogenes分離基物: 污泥凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Aspergillus│niger斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)檸檬酸。培養(yǎng)基: CM0013生長條件: 35℃存儲(chǔ)條件: 礦物油法
Auricularia│auricula斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)研究,栽培農(nóng)藝性狀研究培養(yǎng)基: 14生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Lactobacillus│rhamnosus凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0006生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Pseudomonas│sabulinigri分離基物: 水樣/深海底層水樣斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自原油富集菌群培養(yǎng)基: 1001生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Streptomyces│ansochromogenes var. pallens凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法