公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
檸檬酸鈉抗原修復(fù)液 | 100ml | FS-R7269 |
產(chǎn)品分類:免疫組化
儲存條件:4℃,12個月
用途:用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。
注意事項:常用的抗原修復(fù)液,主要由檸檬酸鈉組成,調(diào)PH值6.0。
配制與標(biāo)定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
污膠鼓菌人乙型肝炎表面抗原單克抗體(檢測)Human STOML1 ELISA Kit大鼠骨織(Ostn)免疫試劑盒
白色沉積物桿菌人乙型肝炎e抗原單克(包被)抗體Human STK4 ELISA Kit大鼠骨粘連蛋白(ON)免疫試劑盒
根瘤菌人乙型肝炎e抗原單克(檢測)抗體Human STOM(Stomatin) ELISA Kit大鼠骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白免疫試劑盒
拜氏醋桿狀菌小鼠抗人血紅蛋白單克抗體Human STK16 ELISA Kit大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)免疫試劑盒
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;图仔土鞲胁⊙贵wHuman STXBP3 ELISA Kit大鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)免疫試劑盒
淡紫青霉磷化HER2受體抗體Human SULT1C2 ELISA Kit大鼠骨特性堿性磷C端肽免疫試劑盒
谷棒桿菌Ⅰ型組蛋白去乙?;?抗體Human SULT2B1 ELISA Kit大鼠骨橋(OPN)免疫試劑盒
假單胞菌屬磷化HER2受體抗體Human SULT2A1 ELISA Kit大鼠骨堿性磷(BALP)免疫試劑盒
莖點霉屬磷化組蛋白去乙?;?/span>8抗體Human SULT4A1 ELISA Kit大鼠骨鈣(OT)免疫試劑盒
黃柄雞油菌HLA-DR抗體Human SUMF2 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌人類白抗原G抗體Human SUMF1 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌高遷移率族蛋白A2抗體Human TBXAS1(Thromboxane-A synthase) ELISA Kit大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫試劑盒
丁香直絲鏈霉菌高遷移率族蛋白B1抗體Human SUCLA2 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒
交鏈孢菌血紅氧合2抗體Human SUCLG2 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白3(BMP-3)免疫試劑盒
白金針21HOXc8抗體Human SUCLG1 ELISA Kit大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒
漏斗狀側(cè)耳(鳳尾菇)原癌基因H-ras抗體Human ARG1(Arginase-1) ELISA Kit大鼠骨保護(hù)(OPG)免疫試劑盒
核桃黃極毛桿菌Xanthomonas│campestris pvar. juglandis (Pammel) Dowson 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)楊梅苷
土生類諾氏菌Nocardioides│terrigena 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.95%(GC)氧化槐果堿
大腸埃希氏菌DH5α/pcDNA-Gag-NC-C15S/C18SEscherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)莪術(shù)二
檸檬酸鈉抗原修復(fù)液HO-2 ELISA Kit 大鼠血紅su氧合mei2規(guī)格: 48T
Cr ELISA Kit 大鼠骨膠原交聯(lián)規(guī)格: 48T
C I CP ELISA Kit 大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽規(guī)格: 48T
DPD ELISA Kit 大鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉規(guī)格: 48T
PY ELISA Kit 大鼠吡啶交聯(lián)物規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。