產(chǎn)品分類:微生物染色
儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月
用途:用于卡氏肺囊蟲、病毒包涵體、小腸的潘氏顆粒、漿細(xì)胞的Russel小體和纖維素的染色。
注意事項(xiàng):甲醛固定,石蠟包埋。熒光桃紅和酒石黃聯(lián)合染色??ㄊ戏文蚁x滋養(yǎng)體和病毒包涵體呈亮紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)褐色,背景呈黃色。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
卡氏肺囊蟲染色液 | 6×50ml | FS-R7062 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
香菇磷化角蛋白8抗體Human IgA2(Immumoglobulin A2) ELISA Kit人清道夫受體類B成員1(SCARB1)免疫試劑盒
嗜鹽細(xì)菌屬鈣結(jié)合蛋白D28K抗體Human IGFALS(Insulin Like Growth Factor Binding Protein, Acid Labile Subunit) ELISA Kit人輕鏈鐵蛋白(L-ferritin)免疫試劑盒
短小克銀漢霉磷化接頭蛋白CrkL抗體Human IGF2R(Insulin Like Growth Factor 2 Receptor) ELISA Kit人(HYD)免疫試劑盒
傷菌磷化接頭蛋白CrkL抗體Human HSF2(Heat Shock Transcription Factor 2) ELISA Kit人青少年2型血色沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)免疫試劑盒
干草鞘單胞菌促腎上腺皮質(zhì)釋放激受體1抗體Human HSP-70(Heat Shock Protein 70) ELISA Kit人親環(huán)蛋白A(PPIA/CYPA)免疫試劑盒
黃桿菌磷化絲切蛋白抗體Human HSPG(Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)免疫試劑盒
假單胞菌屬皮層肌動(dòng)蛋白抗體Human HSPβ6/HSP-20(Heat Shock Protein Beta 6) ELISA Kit人鞘脂激活蛋白原(PSAP)免疫試劑盒
天青鏈霉菌促腎上腺皮質(zhì)釋放激受體2抗體Human HYOU1(Hypoxia Up Regulated 1) ELISA Kit人鞘磷脂(SM)免疫試劑盒
孢囊桿菌磷化原癌基因c-kit抗體Human HCCS(Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit人鞘激1(SPK1)免疫試劑盒
腸膜明串珠菌磷化原癌基因c-kit抗體Human HDAC2(Histone Deacetylase 2) ELISA Kit人鞘(SPH)免疫試劑盒
深海芽孢桿菌胸腺基質(zhì)淋巴生成受體抗體Human GUCA2B(Guanylate Cyclase Activator 2B) ELISA Kit人橋粒芯糖蛋白3抗體(IgG)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌磷化受體酪激c-Abl抗體Human GUCA2A(Guanylate Cyclase Activator 2A) ELISA Kit人橋粒芯糖蛋白2(DSG2)免疫試劑盒
抗生鏈霉菌磷化受體酪激c-Abl抗體Human HBβ(Hemoglobin Beta) ELISA Kit人橋粒芯糖蛋白1抗體(IgG)免疫試劑盒
谷棒桿菌蛋白磷激PKC/CPI-17抗體Human HAGH(Hydroxyacylglutathione Hydrolase) ELISA Kit人橋粒糖蛋白2(DSC2)免疫試劑盒
節(jié)桿菌屬磷化受體酪激c-Abl抗體Human H-Cadherin(Cadherin, Heart) ELISA Kit人羥賴糖苷(HOLG)免疫試劑盒
黑根須腹菌磷化受體酪激c-Abl抗體Human HBμ(Hemoglobin, Mu) ELISA Kit人羥賴(Hyl)免疫試劑盒
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>95%(HPLC),BCB生長(zhǎng)因子試劑盒蒼術(shù)
鼠疫耶爾森氏菌Yersinia│pestis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCB淋巴瘤因子6試劑盒赤松
盧森坦海旋菌Thalassospira│lucentensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRB淋巴瘤-XL試劑盒重樓皂苷E
卡氏肺囊蟲染色液TdT(Human terminal deoxynucleotidyl transferase) ELISA Kit 人末端脫氧核suan轉(zhuǎn)移mei規(guī)格: 48T
IDO(Human indoleamine 2,3-dioxygenase) ELISA Kit 人an2,3-雙加氧mei規(guī)格: 48T
PRSS(Human serine protease) ELISA Kit 人絲氨suan蛋白mei規(guī)格: 48T
Syk(Human spleen tyrosine kinase) ELISA Kit 人脾臟酪氨suan激mei規(guī)格: 48T
STK(Human serine/threonine protein kinase) ELISA Kit 人絲氨suan/蘇氨suan蛋白磷suanmei規(guī)格: 48T