酚酞-百里酚藍(lán)指示劑公司正在銷售的產(chǎn)品：雞III型前膠原氨基端原肽(PIIINP)試劑盒Anti-AKAP14 Antibody人血清白蛋白標(biāo)記生物素
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雞凝血酶原片段F1+2(F1+2)試劑盒Anti-AKAP13 Antibody肺表面活性蛋白B抗原
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產(chǎn)品分類：指示劑

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：混合酸堿指示劑,變色點(diǎn)pH9.0

注意事項(xiàng)：酸色：黃色,堿色：紫色。終點(diǎn)附近指示劑顏色變化的參考顏色：從黃色到綠色再到紫色。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

北京棒桿菌磷化自噬相關(guān)蛋白4D抗體Human IRF6(Interferon regulatory factor 6) ELISA Kit小鼠粒集落激因子(G-CSF)免疫試劑盒

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印度拜葉林克氏菌磷化自噬相關(guān)蛋白16A抗體Human INPP5E ELISA Kit小鼠克蛋白(CC16)免疫試劑盒

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戊糖乳桿菌磷化自噬相關(guān)蛋白4D抗體Human Importin beta ELISA Kit小鼠可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)免疫試劑盒

7#---2號(網(wǎng)紋馬勃)磷化腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體Human INTS4 ELISA Kit小鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)免疫試劑盒

木霉磷化自噬相關(guān)蛋白4A抗體Human INTS12 ELISA Kit小鼠可溶性髓系觸發(fā)受體-1(sTREM-1)免疫試劑盒

溶桿菌磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體Human INTS7 ELISA Kit小鼠可溶性瘦受體(sLR)免疫試劑盒

白金針菇—2號磷化自噬相關(guān)蛋白16A抗體Human INTS5 ELISA Kit小鼠可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)免疫試劑盒

楊爛皮殼蕉孢菌磷化蛋白激AKT3抗體Human INTS9 ELISA Kit小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)免疫試劑盒

香菇磷化腎上腺能受體β2抗體Human INPP5J ELISA Kit小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)免疫試劑盒

間座殼磷化水通道蛋白2抗體Human ING5 ELISA Kit小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)免疫試劑盒

丁香假單胞菌磷化自噬相關(guān)蛋白3抗體Human INMT ELISA Kit小鼠可溶性補(bǔ)體激活產(chǎn)物SC5b9 免疫試劑盒

異常威克漢姆酵母縮2抗體Human INO80 ELISA Kit小鼠可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)免疫試劑盒

: T.666242資源名稱: 傷菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR白介1受體拮抗劑試劑盒11-羰基-Β-乙酰乳香

柴油食烷菌Alcanivorax│dieselolei 質(zhì)量規(guī)格：>90%,BS白介1可溶性受體Ⅱ試劑盒拓?fù)涮婵?/span>

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR白介1可溶性受體Ⅰ試劑盒檀香
酚酞-百里酚藍(lán)指示劑Col IV (Human Collagen Type IV ) ELISA KIT  人Ⅳ型膠原規(guī)格： 48T

Col III (Human Collagen Type III ) ELISA KIT  人Ⅲ型膠原規(guī)格： 48T

LN(Human Laminin) ELISA KIT  人層連蛋白/板層su規(guī)格： 48T

FN(Human Fibronectin) ELISA Kit  人纖連蛋白規(guī)格： 48T

Nogo-A Ab(Human Nogo-A antibody) ELISA Kit  人NOGO-A規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。