詳細介紹
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
六胺銀染色液 | 5×50ml | FS-R7061 |
產品分類:微生物染色
儲存條件:4℃,避光,6個月
用途:用于真菌(馬爾尼菲青霉菌)和卡氏肺囊蟲類生物的染色
注意事項:甲醛固定,石蠟包埋。真菌、肺囊蟲、黑色素染為棕黑色或黑色,背景為橙黃色。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
杏鮑菇磷化p21蛋白抗體Human IL-23(Interleukin 23) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-7(SIRT7/SIR2L7)免疫試劑盒
肺形側耳磷化p21蛋白抗體Human IL-19(Interleukin 19) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-6(SIRT6/SIR2L6)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌8號染色體開放閱讀框84抗體Human IgA2(Immumoglobulin A2) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-5(SIRT5/SIR2L5)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化p21蛋白抗體Human IGF2BP3(Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-4(SIRT4/SIR2L4)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化轉錄調節(jié)因子CEBP α 抗體Human HSF2(Heat Shock Transcription Factor 2) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)免疫試劑盒
小紅酵母CLEC2D蛋白抗體Human HSP-70(Heat Shock Protein 70) ELISA Kit人去乙?;疭irtuin-1(SIRT1/SIR2L1)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌富含半胱與表皮生長因子樣蛋白2抗體Human HSPβ6/HSP-20(Heat Shock Protein Beta 6) ELISA Kit人去乙?;囸I激(dGHRL)免疫試劑盒
球形節(jié)桿菌醌氧化還原樣蛋白1抗體Human HSPG(Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit人去唾液糖蛋白受體(ASGPR)抗體免疫試劑盒
米曲霉銅代謝結構域蛋白9抗體Human HYOU1(Hypoxia Up Regulated 1) ELISA Kit人去唾液糖蛋白受體(ASGPR)免疫試劑盒
山羊葡萄球菌濃縮2復合亞基D3抗體Human IFABP/FABP2(Intestinal Fatty Acid Binding Protein) ELISA Kit人去甲腎上腺(NA)免疫試劑盒
克魯斯假絲酵母磷化分裂周期蛋白6抗體Human IL-35(Interleukin 35) ELISA Kit人趨化因子受體3(CCR3)免疫試劑盒
泡盛曲霉磷化周期依賴激2抗體Human IFN-α(Interferon Alpha) ELISA Kit人趨化因子配體17(CXCL17)免疫試劑盒
薄層菌碳酐12抗體Human INHB(Inhibin B) ELISA Kit人趨化因子26(CCL26)免疫試劑盒
釀酒酵母泛載體蛋白R2抗體Human IgA1(Immunoglobulin A1) ELISA Kit人趨化因子2(CXCL2)免疫試劑盒
粘附分子3抗體Human IGF2BP3(Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3) ELISA Kit人趨化因子(FK)免疫試劑盒
仙芝(靈芝屬之一種)整合相關蛋白CD47Human INSL5(Insulin Like Protein 5) ELISA Kit人驅動蛋白家族成員27(KIF27)免疫試劑盒
豬丹毒絲菌Erysipelothrix│rhuriopathiae 質量規(guī)格:>99%,BCC1q/TNF相關蛋白3試劑盒對氧基
聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質量規(guī)格:>99%,BRB因子試劑盒丁香油
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis Berliner 質量規(guī)格:BSB受體相關蛋白31試劑盒橙皮油內酯
六胺銀染色液PLC(Human Phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯meiC規(guī)格: 48T
Tyk-2(Human tyrosine kinase2) ELISA Kit 人酪氨suan激mei2規(guī)格: 48T
ICE(Human Interleukin 1 Beta converting enzyme) ELISA Kit 人白介su1β轉換mei規(guī)格: 48T
ILK-1(Human integrin-linked kinase 1) ELISA Kit 人整合su連接激mei1規(guī)格: 48T
CYP21B(Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase) ELISA Kit 人細胞色suP450c21B/21-羥化mei規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。