詳細(xì)介紹
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時,熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鈣熒光探針Fluo-4, AM
貨號:FSP074
產(chǎn)品規(guī)格:100 μg/1 mg/10×100 μg
分類:熒光核酸試劑
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報告,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
大鼠脯氨酸羥化酶(PHD)分析檢測試劑盒SUMO-2/3 (18H8) Rabbit mAb (HRP Conjugate)100 ul
大鼠泛素結(jié)合酶UBC5 分析檢測試劑盒ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb100 ul
大鼠二?;视停?/font>DAG/DG)分析檢測試劑盒Cleaved Caspase-8 (Asp387) (D5B2) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific) (PE Conjugate)100 ul
大鼠巢蛋白(NID)分析檢測試劑盒YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb20 ul
大鼠白介素26(IL-26)分析檢測試劑盒YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb100 ul
大鼠白介素20(IL-20)分析檢測試劑盒SYAP1/BSTA Antibody100 ul
大鼠白介素16(IL-16)分析檢測試劑盒LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate)500 ul
大鼠白介素12(IL-12/P70)分析檢測試劑盒SimpleChIP® Human RNU2-1 Promoter Primers100 ul
大鼠N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體亞單位NR2 分析檢測試劑盒PHB2 (E1Z5A) Rabbit mAb100 ul
大鼠c-jun 分析檢測試劑盒CdGAP (D6J9G) Rabbit mAb100 ul
人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞價格APC11 (D1E7Q) Rabbit mAb100 ul
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞報價A1/Bfl-1 (D1A1C) Rabbit mAb100 ul
人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞報價Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (197G2) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
293(人胚腎細(xì)胞)現(xiàn)貨供應(yīng)Catalase (D5N7V) Rabbit mAb100 ul
DLD-1(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)價格MORF4L1/MRG15 (D2Y4J) Rabbit mAb100 ul
COLO 320DM(人結(jié)腸癌細(xì)胞)報價IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul
BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞)現(xiàn)貨供應(yīng)GIMAP5 Antibody100 ul
鈣熒光探針Fluo-4, AM Saccharomyces│cerevisiae凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 以糖蜜為原料發(fā)酵制酒精。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Acetobacter│pasteurianus斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀造食醋。培養(yǎng)基: CM0001生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill.分離基物: 蟲體斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Shigella│boydii凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 致病菌芯片培養(yǎng)基: 51生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Penicillium│sp.分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生理活性物質(zhì),次核苷酸脫氫酶抑制活性培養(yǎng)基: CM0018生長條件: 26C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié);礦物油法;定期移植法
Pseudomonas│stutzeri凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Nocardiopsis│sp.分離基物: 鹽土凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 環(huán)境培養(yǎng)基: CM0237生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
Bacillus│thuringiensis斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法