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TMK緩沖液

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更新時間:2022-07-04 14:46:43瀏覽次數(shù):334

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100ml
貨號 FS-R6515 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6515
TMK緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品:兔TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1(TIEG1)試劑盒 Anti-FGA AntibodyIQCJ抗體
兔白介素22(IL-22)試劑盒Anti-FGA AntibodySH2結(jié)構(gòu)域蛋白C3抗體
兔甲狀旁腺樣蛋白(PLP)試劑盒Anti-FGB Antibody2型豬鏈球溶血素抗體
兔胎盤鈣黏蛋白(P-Cadherin)試劑盒Anti-FGF1 Antibody肺表面活

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

TMK緩沖液

100ml

FS-R6515

產(chǎn)品分類:細(xì)胞組分分離

儲存條件:室溫,12個月

用途:又稱Tris-MgCl2-KCl緩沖液,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離緩沖液

注意事項(xiàng):主要由Tris-HCl、氯化鎂、氯hua鉀組成。

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

Vildagliptin(標(biāo)準(zhǔn)品) Ifosfamide促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子抗體包裝1g

α-甘(標(biāo)準(zhǔn)品) Ifosfamide促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子抗體包裝5g

α-對羥基甘(標(biāo)準(zhǔn)品) Pramipexole 2HCL monohydrate5號染色體開放閱讀框54抗體包裝1g

α-代-β- Pramipexole 2HCL monohydrateCD93抗體包裝5g

α-基吡啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Vinblastine Sulfate嗜粒趨化蛋白CCL6抗體包裝5g

α-三聯(lián)噻吩(標(biāo)準(zhǔn)品) Vinblastine Sulfate6號染色體開放閱讀框81抗體包裝1g

α-戊二(標(biāo)準(zhǔn)品) Vinblastine Sulfate巨噬炎性蛋白1β抗體包裝1g

β-Estradiol(標(biāo)準(zhǔn)品) TemozolomideNK抑制性受體2DL4抗體包裝5g

β-(標(biāo)準(zhǔn)品) TemozolomideNK抑制性受體2DS4抗體包裝1g

β-環(huán)糊精(標(biāo)準(zhǔn)品) AminoglutethimideNK抑制性受體3DL1抗體包裝5g

阿達(dá)唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Aminoglutethimide7號染色體開放閱讀框46抗體包裝100g

(標(biāo)準(zhǔn)品) Flutamide蛋白磷PP2A癌抑制蛋白抗體包裝25g

阿德福韋(標(biāo)準(zhǔn)品) Flutamide巨噬甘露糖受體CD206抗體包裝1g

阿德福韋/(標(biāo)準(zhǔn)品) Cyclophosphamide淋巴衍生C-型凝集抗體包裝5g

(標(biāo)準(zhǔn)品) Cyclophosphamide5號染色體開放閱讀框60抗體包裝1g

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血管生成抑制因子試劑盒新對葉百部堿;Neotuberostem

慢生大豆根瘤菌Bradyrhizobium│japonicum 質(zhì)量規(guī)格:含量>98.5%,BR血管生成樣蛋白4試劑盒小蕓木;Micromelin

ATCC17588=IFO14165=IAM12668資源名稱: 施氏假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR血管生成樣蛋白3試劑盒薟精;Darutigenol
TMK緩沖液MSLN /FITC  熒光標(biāo)記間皮IgG濃馥香蘭 98%

MST1/FITC  熒光標(biāo)記蛋白激MSTIgG環(huán)戊烯酮 98%

Phospho-Mst1 (Thr183)/Mst2 (Thr180) /FITC  熒光標(biāo)記化蛋白激MSTIgG2-呋喃 99%

MT/FITC  熒光標(biāo)記金屬硫蛋白IgG愈創(chuàng)木油

MTA1/FITC  熒光標(biāo)記腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1IgG3,4-己二酮 96%

MTHFR/FITC  熒光標(biāo)記亞四氫葉還原IgG3,4-己二酮 96%,FCC

MTL/FITC  熒光標(biāo)記胃動IgG茉莉凈油

MTLR/FITC  熒光標(biāo)記抗胃動受體IgG薰衣草油 natural

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

 


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