詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | α2纖溶酶色素上皮衍生因子抗體 |
英文名稱 | Alpha 2 antiplasmin |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
灰色產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces griseochromogenes
丙氨菌素鏈霉菌 Streptomyces alasinicus
未知諾卡氏菌 cardia igrata
極暗黃鏈霉菌 Streptomyces fulvissimus
釘斑鏈霉菌 Streptomyces clavifer
香川鏈霉菌 Streptomyces kagawaensis
生米卡鏈霉菌 Streptomyces mycarofaciens
肉桂(地)鏈霉菌 Streptomyces cinnamonensis
曉多鏈霉菌 Streptomyces showdoensis
金羊毛鏈霉菌 Streptomyces chrysomallus
尿素瓊培養(yǎng)基基礎(chǔ)250克Urease Agar Base細(xì)菌脲酶檢測(cè),腸桿菌鑒別
KCN培養(yǎng)基基礎(chǔ)100克Potassium Cyanide Medium Base用于鑒別腸道細(xì)菌KCN抑制試驗(yàn)
V-P半固體瓊250克Voges-Proskauer Semisolid Agar細(xì)菌V-P試驗(yàn)
胰蛋白胨水肉湯250克Tryptone Broth靛基質(zhì)試驗(yàn)
二鹽培養(yǎng)基10克Malonate Broth用于測(cè)定腸道細(xì)菌對(duì)二鹽的利用試驗(yàn)
脫氧核糖核酶瓊100克Dnase Agar用于細(xì)菌DNA酶檢測(cè)
MR-VP試驗(yàn)用培養(yǎng)基250克MR VP Broth腸桿菌科細(xì)菌的基紅和VP試驗(yàn)
緩沖葡萄糖蛋白胨水100克Buffer Glucose Peptone Water腸桿菌科細(xì)菌的基紅-VP試驗(yàn)
明膠培養(yǎng)基250克Gelatin Medium細(xì)菌明膠液化試驗(yàn)
靛基質(zhì)培養(yǎng)基250克Indole Medium細(xì)菌靛基質(zhì)試驗(yàn)
賴脫羧酶培養(yǎng)基5克Lysine Decarboxylase Medium用于細(xì)菌賴脫羧酶試驗(yàn)
脫羧酶對(duì)照試驗(yàn)培養(yǎng)基5克Decarboxylase Control Medium脫羧酶試驗(yàn)陰性對(duì)照(無基)
α2纖溶酶色素上皮衍生因子抗體Corynebacterium stationis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 溶菌試驗(yàn)。培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g(液體培養(yǎng)基不含),蒸餾水 1.0L,pH7.0。121℃,15min。生長(zhǎng)條件: 30℃,好氧存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Actinomadura napierensis種屬: Actinomadura napierensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: CM0027生長(zhǎng)條件: 28C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
Aspergillus oryzae分離基物: 酶曲提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 白酒糖化菌。培養(yǎng)基: CM0085生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法;其他
Geotrichum candidum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 油脂酵母培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Candida guilliermondii提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 高粱酒糙醅酵母,能在常三線油斜面上生長(zhǎng)。培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Lycoperdon excipuliforme (Scop.) Pers.分離基物: 組織塊提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25-30存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Verticillium dahliae分離基物: 棉花病桿提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Alcanivorax jadensis分離基物: 水樣/深海海水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Nocardia sp.提供形式: 凍干物模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)、及普通環(huán)境微生物的研究培養(yǎng)基: 38生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法