詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 鈣周期素結(jié)合蛋白抗體 |
英文名稱 | CACYBP |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
Rivastigmine Metabolite (NAP22690) Labeled d4 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口GTP溶液,2.5 mM(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)
Caffeic acid methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口m7G(5')ppp(5')A帽結(jié)構(gòu)類似物
Caffeic acid 1,1dimethylallyl ester 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口m7G(5')ppp(5')G帽結(jié)構(gòu)類似物
Caffeic Acid3C3 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口NTP溶液,10 mM
Phenylethyl 3methylcaffeate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口SP6體外轉(zhuǎn)錄試劑盒
Diphenhydramined6 Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口T3體外轉(zhuǎn)錄試劑盒
Pranlukast hemihydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口T7體外轉(zhuǎn)錄試劑盒
(R)Metoprolol 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口UTP溶液,100 mM
αHydroxy Metoprolol(Mixture of Diastereomers) 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口UTP溶液,2.5 mM(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)
(S)Metoprolol 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口天凈沙RiboSPIA cDNA擴(kuò)增試劑盒
ODesmethyl Metoprolol 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口天凈沙SPIA擴(kuò)增試劑盒(用于擴(kuò)增DNA模板)(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)
Dehydro Amlodipine Oxalate 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口天凈沙通用型MLPA試劑盒(停產(chǎn))
(R)Amlodipine 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口單細(xì)胞擴(kuò)增
Aprepitant Labeled d4 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口單細(xì)胞裂解液(DNA)
AprepitantM3 Metabolite 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口單細(xì)胞裂解液(RNA)
Dehydro Aripiprazole Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒
Aripiprazoled8 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口單細(xì)胞懸浮液
鈣周期素結(jié)合蛋白抗體200mg線粒體呼吸鏈復(fù)合體III活性檢測試劑盒 可見分光光度法157885-28-4604-80-896T抗神經(jīng)元核抗體2型(ANNA2)HPLC≥98%抗麥膠蛋白抗體檢測試劑盒20mgCCL21104376-79-6化學(xué)試劑Intersectin 2蛋白(ITSN2)500mg線粒體呼吸鏈復(fù)合體III活性檢測試劑盒 可見分光光度法157885-28-429477-83-696T抗Sa抗體(Anti-Sa)HPLC≥98%抗麥膠蛋白檢測試劑盒1mgCCL527164-46-1化學(xué)試劑Janus激酶3(JAK3)
500mg線粒體呼吸鏈復(fù)合體III活性檢測試劑盒 可見分光光度法157885-28-429477-83-696T抗Sa抗體(Anti-Sa)HPLC≥98%抗麥膠蛋白檢測試劑盒1mgCCL527164-46-1化學(xué)試劑Janus激酶3(JAK3)200mg線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ活性檢測試劑盒 微量法157885-28-4138-52-396TSp100核抗原(Sp100)HPLC≥98%抗卵子抗體試劑盒20mgNE27164-46-1化學(xué)試劑Janus激酶2(JAK2)
200mg線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ活性檢測試劑盒 微量法157885-28-4138-52-396TSp100核抗原(Sp100)HPLC≥98%抗卵子抗體試劑盒20mgNE27164-46-1化學(xué)試劑Janus激酶2(JAK2)100mg線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ活性檢測試劑盒 可見分光光度法157885-28-469-72-796T抗白蛋白抗體(AAA)HPLC≥98%抗卵巢抗體檢測試劑盒20mgASGPR58-58-2化學(xué)試劑吻素受體(KISS1R)
100mg線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ活性檢測試劑盒 可見分光光度法157885-28-469-72-796T抗白蛋白抗體(AAA)HPLC≥98%抗卵巢抗體檢測試劑盒20mgASGPR58-58-2化學(xué)試劑吻素受體(KISS1R)100mg線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ活性檢測試劑盒 可見分光光度法68652-09-5119-36-896T尾加壓素2受體(UTS2R)HPLC≥98%抗流行性出血熱病毒抗體IgM檢測試劑盒1mli-PTH58-58-2化學(xué)試劑核纖層蛋白B2(LMNB2)
100mg線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ活性檢測試劑盒 可見分光光度法68652-09-5119-36-896T尾加壓素2受體(UTS2R)HPLC≥98%抗流行性出血熱病毒抗體IgM檢測試劑盒1mli-PTH58-58-2化學(xué)試劑核纖層蛋白B2(LMNB2)200mg線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ活性檢測試劑盒 微量法68652-09-596553-02-596T回腸脂肪結(jié)合蛋白(FABP6)HPLC≥98%抗流行性出血熱病毒抗體檢測試劑盒20mgALD1405-20-5化學(xué)試劑尿溶蛋白3B(UPK3B)