商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: C4H又稱(chēng)反式肉桂酸-4-單氧化酶,多存在于高等植物、酵母、菌類(lèi)中,該酶催化肉桂酸羥化作用產(chǎn)生4-香豆酸鹽,是苯丙烷途徑中繼L-苯丙an酸解氨酶之后的第二個(gè)關(guān)鍵酶。 測(cè)定原理: C4H催化肉桂酸和NADP生成4-香豆酸鹽和NADPH,在340nm下測(cè)定NADPH生成速率,即可反映C4H活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類(lèi)SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
猴頭兒茶O甲基移位抗體Human UCMA(Unique cartilage matrix-associated protein) ELISA Kit人纖維連接蛋白(cFn)免疫試劑盒
馬克斯克魯維酵母補(bǔ)體C1qTNF9鏈多肽抗體Human Cytochrome b-245 Beta Polypeptide ELISA Kit人外基質(zhì)磷糖蛋白(MEPE)免疫試劑盒
出芽短梗霉平滑肌鈣調(diào)蛋白CNN2抗體Human NADPH oxidase 5 ELISA Kit人色P450c21B/21-羥化(CYP21B)抗體免疫試劑盒
聚生殼菌心肌病相關(guān)蛋白2Human NEK2(Serine/threonine-protein kinase Nek2) ELISA Kit人色P450c21A/21-羥化(CYP21A)免疫試劑盒
球孢白僵菌5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框34抗體Human HBeAg(hepatitis B virus E Antigen) ELISA Kit人色P450(CYP450)免疫試劑盒
釀酒酵母E1A激活基因激蛋白1抗體Human HBeAb(hepatitis B virus E Antibody) ELISA Kit人色c氧化亞基VIB多肽1(廣泛存在)(COX6B1)免疫試劑盒
根瘤菌2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體Human NEK2(Serine/threonine-protein kinase Nek2) ELISA Kit人色c氧化亞基5B,線粒體(COX5B)免疫試劑盒
松口蘑豬瘟病抗體Human EZH2(Enhancer of zeste homolog 2) ELISA Kit人色c氧化亞基5A,線粒體(COX5A)免疫試劑盒
斑玉蕈3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體Human HBcAb(hepatitis B virus Core antibody) ELISA Kit人色c氧化Ⅵα亞基多肽1(COX6A1)免疫試劑盒
醬油曲霉2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43抗體Human τPK1(Tau-Protein Kinase) ELISA Kit人色C氧化(COX)免疫試劑盒
釀酒酵母豬瘟病抗體Human VEGF165(Vascular Endothelial Growth Factor165) ELISA Kit人色C-1(CYC1)免疫試劑盒
蝦苗殺蝦微桿菌中心體蛋白110抗體Human VEGF-B(Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) ELISA Kit人色b561(cytb561)免疫試劑盒
果生鏈核盤(pán)菌纖維Human VASPIN(Visceral Adipose Specific Serine Protease Inhibitor) ELISA Kit人絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)免疫試劑盒
根瘤菌分裂周期蛋白14B抗體Human VEGF-D(Vascular Endothelial Growth Factor D) ELISA Kit人膜DNA抗體(cmDNA)免疫試劑盒
食淀粉乳桿菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框177抗體Human VIL1(Villin 1) ELISA Kit人角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)免疫試劑盒
冷海水黃桿菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框183抗體Human WARS(Tryptophanyl tRNA Synthetase) ELISA Kit人角蛋白18-M65(CK 18-M65)免疫試劑盒
厚垣孢普可尼亞菌Pochonia│chlamydospora 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDNA基轉(zhuǎn)移3A試劑盒狗牙花堿D
黃暗青霉Penicillium│citreonigrum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCDNA基轉(zhuǎn)移1試劑盒高車(chē)前
瓊氏不動(dòng)桿菌Acinetobacter│junii 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BPDnaJ同源亞科B成員1試劑盒廣防風(fēng)苷A
肉桂酸4羥化酶(C4H)測(cè)試盒50管/48樣Streptomyces flavovariabilis 17,21-二酸酯載脂蛋白A4Elisa
居白蟻 5--2-甲氧基苯載脂蛋白BElisa
釀酒酵母 氮芥鹽酸鹽載脂蛋白B1Elisa
黑靈芝 5-溴噻吩-2-磺酰載脂蛋白B100Elisa
兩粵黃檀根瘤 5-溴-2-乙氧基吡啶載脂蛋白C2Elisa
灰藤黃鏈霉 3-基硅氧基-1-炔載脂蛋白C3Elisa
南方散斑殼 3-氨基-5-叔丁基異惡唑載脂蛋白EElisa
瓜類(lèi)* 2,3,4,5-四氟載脂蛋白MElisa
中國(guó)臺(tái)灣根霉 鹽酸倍他司增殖核抗原Elisa
盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢 蘇尼替尼增殖核抗原抗體Elisa
鐘器腐霉 乙鹽酸鹽粘蛋白;粘液5BElisa
黃曲霉 2-甲基-3-硫乙酸酯粘蛋白2Elisa
產(chǎn)紫青霉 2,5-二甲基-3-硫粘蛋白5ACElisa
炭黑曲霉 促腎上腺皮質(zhì)片段 (1-16), 人粘膠蛋白;肌腱蛋白CElisa
噬瓊脂鏈卵 2-氟-5-羥基吡啶整合αMElisa