公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義 淀粉酶(EC3.2.1.1)是催化淀粉水解的一類酶的總稱。土壤中的淀粉酶主要來自于微生物,是一種重要的酶制劑,廣泛應(yīng)用于糧食加工、食品、釀造、發(fā)酵、紡織品工業(yè)和醫(yī)藥行業(yè)。 測(cè)定原理 淀粉酶水解淀粉產(chǎn)生還原糖,可與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì),在508nm處有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內(nèi)與還原糖量成正比。 需自備的儀器和用品 天平、水浴鍋、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
空腸彎曲桿菌脂聯(lián)受體2抗體Human LSM8 ELISA Kit豬去乙?;囸I激(dGHRL)免疫試劑盒
釀酒酵母ANGEL1蛋白抗體Human LSP1 ELISA Kit豬去甲腎上腺(NE)免疫試劑盒
高粱生平臍蠕孢ANGEL2蛋白抗體Human LSR ELISA Kit豬趨化因子配體28(CCL28)免疫試劑盒
糞腸球菌ANKLE2蛋白抗體Human LTBP1(Latent-transforming growth factor beta-binding protein 1) ELISA Kit豬(HYD)免疫試劑盒
彩色豆馬勃特異性錨樣蛋白1抗體Human LUC7L ELISA Kit豬前列腺G/H合2(PTGS2)免疫試劑盒
黑曲霉錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體Human LUC7L2 ELISA Kit豬前列腺F2α(PGF2α)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體Human LY6D ELISA Kit豬前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
白色鏈孢囊菌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體Human LUZP1 ELISA Kit豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLUT2)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體Human LXN ELISA Kit豬皮質(zhì)抑/皮質(zhì)穩(wěn)定蛋白(CORT)免疫試劑盒
核盤菌(正確)錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體Human LSM10 ELISA Kit豬皮質(zhì)(CORT)免疫試劑盒
假腸膜明串珠菌氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP合成6G抗體Human LY6E ELISA Kit豬皮質(zhì)類固結(jié)合球蛋白(SERPINA6)免疫試劑盒
瓶孢青霉錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體Human LSM11 ELISA Kit豬皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒
勞地毛霉錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體Human LY6G5B ELISA Kit豬XIIIB鏈(F13B)免疫試劑盒
釀酒酵母型肝炎病核結(jié)合蛋白-1抗體Human LSM14A ELISA Kit豬XIIIA鏈(F13A1)免疫試劑盒
糙孢藍(lán)狀菌芳香基硫酯K抗體Human LRRC4C ELISA Kit豬X(F10)免疫試劑盒
粉紅粘帚霉神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體Human LRRC8C ELISA Kit豬ⅩⅢ(FⅩⅢ)免疫試劑盒
乳桿菌屬Lactobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR補(bǔ)體片斷5b試劑盒左旋千金藤啶堿
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR補(bǔ)體片斷5a試劑盒紫蘇
竹喙球菌Ceratosphaeria│phyllostachydis Zhang 質(zhì)量規(guī)格:活:20萬(wàn)u/g補(bǔ)體片斷4b試劑盒竹紅菌乙
土壤淀粉酶測(cè)試盒100管/48樣大腸埃希氏 3-苯氧基酸N-乙酰氨基葡萄糖苷Elisa
解橡膠諾氏 4-羥基-2-(三氟甲基)嘧啶-5-甲酸乙酯腸激Elisa
釀酒酵母 2,6-吡啶二羧酸單甲酯抗豬偽狂犬病抗體Elisa
假單胞屬 5-甲基-3-硝基-1H-吡唑抗豬偽狂犬病GB抗體Elisa
腐皮鐮孢 3-甲基-1,3,4-三氮唑8-氧鳥脫氧核苷Elisa
Flavobacterium 4-(4-甲基哌-1-基)苯甲色P4502E1Elisa
芽胞桿屬 3-氨基-5-鞭毛蛋白Elisa
釀酒酵母 6-溴-2-甲基-[1,2,4]三唑并[1,5-A]吡啶延胡索酸Elisa
釀酒酵母 2-嘧啶甲酸甲酯明膠IVElisa
Winogradskyella ulvae 7-甲氧基苯并發(fā)燒伴血小板削減綜合征病Elisa
吸水鏈霉井崗變種 5-嘧啶羧酸甲酯胃蛋白IElisa
大西洋假交替單胞 鹽酸普羅帕酮抗線粒體ADP;ATP載體抗體Elisa
淡紫擬青霉 鄰乙氧基苯甲發(fā)燒伴血小板削減綜合征病抗體Elisa
嗜鹽動(dòng)性球 1-苯基咪唑心肌肌鈣蛋白TElisa
巨大芽孢桿 2,4-二-5-乙基嘧啶硬脂酰去飽和1Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。