詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 細胞分裂周期2樣蛋白激酶5抗體 |
英文名稱 | CDC2L5 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
諾孕酯標準品Rat Aquaporin2 ELISA Kit純度:1000μg/mL
諾沙星標準品Rat Aquaporin1 ELISA Kit純度:0.999
炔諾醋酯標準品Rat Aquaporin1 ELISA Kit純度:0.956
炔諾標準品Rat Aquaporin0 ELISA Kit純度:0.995
重酒石去甲標準品Rat Aquaporin0 ELISA Kit純度:0.928
去甲標準品Rat dihy-drotestosterone ELISA Kit純度:0.998
壬9標準品Rat dihy-drotestosterone ELISA Kit純度:0.996
Porcine procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA Kit豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒進口/分裝規(guī)格:96T/48T121564-200601TLC法鑒別戰(zhàn)骨規(guī)格:8.0g
Porcine low molecular weight heparin,LMWH ELISA Kit豬低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒進口/原裝規(guī)格:96T/48T121565-200601TLC法鑒別螞蟻(棕褐蟻)規(guī)格:1.0g
Porcine listeriolysin O,LLO ELISA Kit豬單核細胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121572-200601TLC法鑒別豨薟草(豨薟)規(guī)格:2.0g
Chicken very low density lipoprotein,VLDL ELISA Kit 雞極低密度蛋白(VLDL)ELISA試劑盒 *規(guī)格:96T/48T121573-200701TLC法鑒別五倍子(青麩楊)規(guī)格:1.0g
Chicken Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA Kit 雞轉化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒進口/分裝規(guī)格:96T/48T121574-201001TCL法鑒別蕓香草規(guī)格:5.0g
Chicken Glucagon,GC ELISA Kit雞胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒 進口/原裝規(guī)格:96T/48T121575-200901TCL法鑒別漢桃葉規(guī)格:3.0g
細胞分裂周期2樣蛋白激酶5抗體150mgHPD600大孔吸附樹脂2058-46-014937-32-796T抗內(nèi)子抗體(AIFA)HPLC≥99%端粒重復序列結合子1檢測試劑盒20mgTN-C102814-08-4化學試劑UDP半糖-4-差向異構酶(GALE)150mgHPD700大孔吸附樹脂80214-83-1111187-15-696T腦啡肽(ENK)HPLC≥98%端粒酶逆轉錄酶檢測試劑盒20mgTI化學試劑半糖-3-O-轉移酶3(GAL3ST3)
150mgHPD700大孔吸附樹脂80214-83-1111187-15-696T腦啡肽(ENK)HPLC≥98%端粒酶逆轉錄酶檢測試劑盒20mgTI化學試劑半糖-3-O-轉移酶3(GAL3ST3)200mgHPD722大孔吸附樹脂80214-83-133390-42-096T低分子量激肽原(LMWK)HPLC≥98%端粒酶檢測試劑盒5mgITGα2β159-14-3化學試劑半糖-3-O-轉移酶4(GAL3ST4)
200mgHPD722大孔吸附樹脂80214-83-133390-42-096T低分子量激肽原(LMWK)HPLC≥98%端粒酶檢測試劑盒5mgITGα2β159-14-3化學試劑半糖-3-O-轉移酶4(GAL3ST4)2gHPD750大孔吸附樹脂80214-83-11073897-80-996T205kDa核孔蛋白(NUP205)HPLC≥98%端粒保護蛋白1檢測試劑盒10mgITG αⅤβ359-14-3化學試劑半糖-3-O-轉移酶2(GAL3ST2)
2gHPD750大孔吸附樹脂80214-83-11073897-80-996T205kDa核孔蛋白(NUP205)HPLC≥98%端粒保護蛋白1檢測試劑盒10mgITG αⅤβ359-14-3化學試劑半糖-3-O-轉移酶2(GAL3ST2)500mgHPD826大孔吸附樹脂84625-61-61182-34-996T簇集蛋白(CLU)HPLC≥98%毒蕈型酰膽受體M2檢測試劑盒20mgIBSP59-14-3化學試劑半糖-3-O-轉移酶1(GAL3ST1)
500mgHPD826大孔吸附樹脂84625-61-61182-34-996T簇集蛋白(CLU)HPLC≥98%毒蕈型酰膽受體M2檢測試劑盒20mgIBSP59-14-3化學試劑半糖-3-O-轉移酶1(GAL3ST1)75mgHPD9*孔吸附樹脂84625-61-630964-13-796T抗原提呈關聯(lián)轉運蛋白(TAP)HPLC≥98%動力蛋白輕鏈1,細胞質檢測試劑盒20mgRANTES;CCL5957-75-5化學試劑G抗原1(GAGE1)