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甲基檸檬酸合酶(MCS)測(cè)試盒50管/48樣

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更新時(shí)間:2022-06-17 13:55:40瀏覽次數(shù):276

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
貨號(hào) AS6321151 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 檢測(cè)方法 可見(jiàn)分光光度法
甲基檸檬酸合酶(MCS)測(cè)試盒50管/48樣公司正在出售的產(chǎn)品:白介1受體9抗體Rabbit Anti-Guinea IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗豚鼠IgM (10nm/15nm)
RasGTP活蛋白IQGAP3抗體Rabbit Anti-MK IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗猴IgG(10nm/15nm)
Iroquois同源蛋白1抗體Rabbit Anti-rat IgG/Gold 金標(biāo)記兔

詳細(xì)介紹

商品介紹:

測(cè)定意義:                          

MCS廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體基質(zhì)中,與檸檬酸合酶(CS)共同參與三羧酸循環(huán)的調(diào)節(jié)。

測(cè)定原理:

MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生甲基檸檬酰fu酶A,進(jìn)一步水解產(chǎn)生甲基檸檬酸;該反應(yīng)促使無(wú)色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無(wú)水乙醇和蒸餾水

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

甲基檸檬酸合酶(MCS)測(cè)試盒50管/48樣

檢測(cè)方法

可見(jiàn)分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格

50管/48樣

產(chǎn)品貨號(hào)

AS6321151

試劑的組成和配制:

酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。

自備儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

NAD+和NADH的提?。?/span>

1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取

NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中

和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);

冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中

和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2、組織中NAD+和NADH的提取:

NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴

中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,

混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span>

NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性

提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液),

超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿

性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),

超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加

入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

ADH測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。

3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。

4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。

注意:空白管只需測(cè)定一次。

赤脛散(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2-Hydroxyacetophenone范可尼貧血組蛋白A抗體包裝25g

赤芍(川赤芍)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2-Isopropylimidazole卷曲蛋白3抗體包裝5g

赤芍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2-NAA, 2-Naphthaleneacetic acid分裂周期樣蛋白20抗體包裝100g

蟲(chóng)草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2-Naphthaldehyde鐵氧化還原蛋白還原抗體包裝25g

臭靈丹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2-Naphthyl acetate磷化堿性成纖維生長(zhǎng)因子受體1抗體包裝5g

臭梧桐葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 3,4,5-Trimethoxycinnamic acid精結(jié)合蛋白17抗體包裝25g

川貝母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 3,4-Dimethoxybenzaldehyde泛樣核糖體蛋白S30/MNSF-β抗體包裝5g

川陳皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 3-HydroxybenzaldehydeF-box蛋白2抗體包裝100g

川燈心草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 3-Hydroxycinnamic acidF-box蛋白45抗體包裝500g

川楝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 4,4-Dihydroxydiphenyl sulfone法尼基二磷合抗體包裝1g

川楝子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 4,5-DichlorofluoresceinIgG-Fc片斷受體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白α抗體包裝25g

川麥冬苷A英文名: 4-Ethoxybenzaldehyde酰基合成4抗體包裝5g

川木通(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 4-Hydroxycoumarin補(bǔ)體因子D抗體包裝25g

川木香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 4-Methoxyphenol補(bǔ)體因子I輕鏈抗體包裝5g

川牛膝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 4-Methylcinnamic acidFAHD1蛋白抗體包裝10g

多粘類芽孢桿菌Paenibacillus│polymyxa 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,BR腎損傷分子1試劑盒去亞基小檗堿;Demethyleneb

AS2.181資源名稱: 魯氏接合酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR腎前體3,5,6,7,8,3’,4’-七氧基

: B739資源名稱: 谷棒桿菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品腎試劑盒25-羥基原人參二;25-OH-PPD
甲基檸檬酸合酶(MCS)測(cè)試盒50管/48樣類高加索酸奶乳桿 巰基苯并噻唑鈉結(jié)核桿IGM抗體Elisa

糙皮側(cè)耳 3-環(huán)戊基-3-氧代酸乙酯分泌型Klotho蛋白Elisa

慢生海桿狀* 4-[(4-氨基苯基)偶氮]苯磺酸單鈉鹽纖維結(jié)合蛋白Elisa

卷枝毛霉詹森變型 (S)-2,6-二叔丁氧羰基氨基己酸可溶性E鈣粘著蛋白;可溶性上皮性鈣黏附蛋白Elisa

黃赭色鏈霉 3-氟-2-甲苯膜聯(lián)蛋白-A2IgG抗體Elisa

阪崎腸桿 2-甲基丁酸苯乙酯膜聯(lián)蛋白-A2IgM抗體Elisa

羅爾斯通氏 3-氨基-4-甲氧基甲酯膜聯(lián)蛋白-A5IgG抗體Elisa

釀酒酵母 4-羥基丁基烯酸酯膜聯(lián)蛋白-A5IgM抗體Elisa

巴斯德畢赤酵母 5-溴-2-甲氧基糖基化終末產(chǎn)物Elisa

糞產(chǎn)堿 克林霉磷酸酯酪酪肽3-36Elisa

漢遜德巴酵母 2,3-二氟-4-溴苯丁PIM1激Elisa

釀酒酵母 2-溴-4,5-二氟長(zhǎng)鏈?;摎銭lisa

無(wú)色桿 基酮長(zhǎng)鏈酰基脫氫Elisa

青藍(lán)鏈霉 2-異丁基-3-甲氧基吡多氧化Elisa

假堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 2,3-二羥基苯甲抗流行性出血熱病IgM抗體Elisa
注意事項(xiàng):

①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。

 


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