自由醛基清除液公司正在銷售的產(chǎn)品：綿羊煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)試劑盒Anti-IFNL1 Antibody熒光素PE標(biāo)記雞IgG
綿羊和肽素(CPP)試劑盒 Anti-IFNB1 Antibody熒光素PE標(biāo)記雞IgM
綿羊球蛋白G2(IgG2)試劑盒Anti-IFNAR2 Antibody熒光素PE標(biāo)記狗IgM
綿羊骨成型蛋白1(BMP-1)試劑盒 Anti-IFNL1 Ant

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：染色其他

儲(chǔ)存條件：4℃,12個(gè)月

用途：洗脫電鏡固定液的緩沖液，用于清洗固定后的標(biāo)本，出去殘留的自由醛基。標(biāo)本經(jīng)醛類固定劑固定后一般都?xì)埩粲凶杂扇┗?，這種自由醛基比較活潑，可與各種抗體的氨基結(jié)合，導(dǎo)致難以清除的非特異性染色，因此標(biāo)本固定后必須*清洗干凈。

注意事項(xiàng)：由PBS、甘氨酸等組成。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

冷溫木克酵母磷化表皮生長因子受體抗體Human KLKB1 (Plasma kallikrein) ELISA KIT人16α羥基雌1(16-α OHE-1)免疫試劑盒

氏蜜環(huán)菌磷化埃茲蛋白抗體Human TTPA(Alpha-tocopherol transfer protein) ELISA Kit人15-羥基前列腺脫氫(15-PGDH)免疫試劑盒

菊異莖點(diǎn)霉磷化埃茲蛋白抗體Human IQUB (IQ and ubiquitin-like domain-containing protein) ELISA KIT人15-epi-氧脂 A4(15-epi-LXA4)免疫試劑盒

白色金針菇磷化轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體Human HCRTR2 (Orexin receptor type 2) ELISA KIT人14-3-3 蛋白 beta/alpha(YWHAB)免疫試劑盒

雞傷菌磷化酪蛋白激A2受體抗體Human IL1F10(Interleukin-1 family member 10) ELISA Kit人12-脂氧化/脂加氧(LOX-12)免疫試劑盒

深紅Ephrin B抗體Human ISLR (Immunoglobulin superfamily containing leucine-rich repeat protein) ELISA KIT人12羥二十烷四烯(12-HETE)免疫試劑盒

尖孢鐮孢磷化Ephrin B抗體Human IGFN1 (Immunoglobulin-like and fibronectin type III domain-containing protein 1) ELISA KIT人11-脫氧皮質(zhì)免疫試劑盒

茶藨子葡萄座腔菌磷化Ephrin B抗體Human ADRA1A(Alpha-1A adrenergic receptor) ELISA Kit人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷化Ephrin B抗體Human IL1RL2 (Interleukin-1 receptor-like 2) ELISA Kit人11β羥類固脫氫1型(11β-HSD1)免疫試劑盒

奇異鏈霉菌磷化Ephrin B抗體Human ICOSLG (ICOS ligand) ELISA KIT人1,5-脫水葡萄糖/1,5-脫水山梨(1,5-AG)免疫試劑盒

芽孢桿菌屬磷化雌激受體α抗體Human Anti-M3 AChR (Anti-M3 Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit人1,4,5-三磷肌(IP3)免疫試劑盒

釀酒酵母磷化雌激受體α抗體Human IKBIP (Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase-interacting protein) ELISA KIT人1,3-二磷甘油(1,3-DPG)免疫試劑盒

球孢白僵菌表皮生長因子受體底物8抗體Human HAGHL (Hydroxyacylglutathione hydrolase-like protein) ELISA KIT人1,25二羥基維生D3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒

灰黃淺黃酵母內(nèi)皮1抗體Human HYLS1 (Hydrolethalus syndrome protein 1 homolog) ELISA KIT人 Liprin alpha 1 免疫試劑盒

瘡痂病鏈霉菌腸道病71型/手足口病病抗體Human IPMK (Inositol polyphosphate multikinase) ELISA KIT人 KIAA1199 免疫試劑盒

Corynebacterium sp.絲裂原活化蛋白激1抗體Human HCAR2 (Hydroxycarboxylic acid receptor 2) ELISA KIT犬

副豬嗜血桿菌Parasuis│Haemophilus 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%棕櫚酯

羅氏擬盤多毛孢Pestalotiopsis│lespedezae 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%異香蘭

黃柄曲霉Aspergillus│flavipes 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%蔗糖
自由醛基清除液Human coagulation factor VIII related antigen,F VIII -Ag ELISA Kit  人Ⅷ相關(guān)抗原規(guī)格： 48T

Human coagulation factor IX ,F IX ELISA Kit  人Ⅸ規(guī)格： 48T

Human coagulation factor X ,F X ELISA Kit  人Ⅹ規(guī)格： 48T

Human von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit  人血管性血友病因子/瑞斯托霉su輔因子規(guī)格： 48T

Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit  人纖溶mei抗纖溶mei復(fù)合物規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。