詳細介紹
商品介紹:
測定意義: AKP/ALP是一種含鋅的糖蛋白酶,在堿性環(huán)境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP廣泛分布于人體各臟器中,以肝臟為主。 測定原理: 在堿性環(huán)境中,AKP/ALP催化磷酸苯二鈉生成游離酚;酚與4-氨基安替bi林和鐵氰hua鉀反應紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測定510 nm吸光度增加速率,來計算AKP活性。 自備儀器和用品: 紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器和蒸餾水。 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321124 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
性紅 73(標準品)英文名: *磷化D酪激衰減蛋白1抗體包裝1g
林鈉(標準品)英文名: N-Acetyl Neuraminic Acid/NANA/Neu5Ac/SA磷化Fas相關死亡結構域蛋白抗體包裝100g
羧司坦(標準品)英文名: Erythromycin磷化D酪激衰減蛋白1抗體包裝500g
他克莫司(標準品)英文名: Erythromycin磷化Fas相關死亡結構域蛋白抗體包裝100g
他扎羅(標準品)英文名: Dobutamine HCL磷化Fas相關死亡結構域蛋白抗體包裝25g
標準品)英文名: HPCD磷化Fas相關死亡結構域蛋白抗體包裝100ml
(標準品)英文名: Carboxymethyl chitosan磷化DNA基轉移1抗體包裝500ml
泰諾福韋;韋(標準品)英文名: Enoxaparin sodium磷化DNA基轉移1抗體包裝100ml
(標準品)英文名: Enoxaparin sodium磷化DNA基轉移1抗體包裝500ml
坦度替尼(標準品)英文名: Trimebutine maleate7脫氫膽固還原抗體包裝1g
碳鈣(標準品)英文名: Heparin sodium大腦發(fā)育同源蛋白2抗體包裝5g
糖精(標準品)英文名: HE-β-CD退行性精母同源物1抗體包裝1g
特比萘芬(標準品)英文名: Nefopam HClDSCC1蛋白抗體包裝1g
特那定(標準品)英文名: Methotrexate disodium 誘捕受體2抗體包裝100g
替比夫定(標準品)英文名: Methotrexate disodium DNA基轉移相關蛋白1抗體包裝25g
米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品尾肢同源蛋白2試劑盒山椒子烯;Zeylenone
: HBUM171309資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR尾加壓Ⅱ 1,3,5,8-四羥基山;1,3,5,
慢生根瘤菌(豇豆族)Bradyrhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP30,BR維生K依賴蛋白Z試劑盒三油甘油酯;Triolein
堿性磷酸酶(AKP/ALP)測試盒100管/48樣枯草芽孢桿 1-苯基-1,3-丁二酮5-甲基四氫高半胱甲基轉移Elisa
綠僵 2,6-二 N-氧化物可提取核抗原Elisa
熱帶假絲酵母 N-甲基-N-苯骨成型蛋白9Elisa
爪哇毛霉 1,4-二甲基吡唑雌馬Elisa
嗜腐爛居真細 2-(4-羥基苯基)酸透明質(zhì)酸Elisa
茄鏈格孢 1,1,1,3-四烷α酮戊二酸Elisa
周雄腐霉 2-氨基苯并噻唑-6-甲酸母親DPP同源物4Elisa
哈茨木霉 2-對苯二硫酸鹽視網(wǎng)膜母瘤蛋白1Elisa
水生恩氏 阿德福韋性T相關抗原Elisa
粉紅單端孢 乙酰肼硫脂Elisa
Homoserinimonas (Z)-N,N-二(2-羥基乙基)-9-十八烯酸??顾枨氏嚓P糖蛋白抗體Elisa
黃曲霉 2-羥基-4′-(2-羥乙氧基)-2-酮結締組織活化肽ⅢElisa
枯草芽孢桿 膦?;宜峒柞ザ阴ズ耸荏w亞家族3C組成員1Elisa
芽胞桿屬 8-甲氧基喹啉什曼病Elisa
米根霉 N-(叔丁氧羰基)-D-賴類風濕因子IgM抗體Elisa
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。