乳酸鈉林格氏液公司正在銷售的產(chǎn)品：豚鼠白血病抑制因子(LIF)試劑盒Anti-INPP5D Antibody腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白6結(jié)合蛋白抗體
豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒Anti-INHA(Inhibin α) AntibodyB基因1抗體
豚鼠Rap鳥嘌呤交換因子1(RAPGEF1)試劑盒Anti-Inhibin alpha/INHA AntibodyT活化連接蛋白抗體
豚鼠內(nèi)肽2(EM

產(chǎn)品分類：細(xì)胞其他

儲(chǔ)存條件：4℃,3個(gè)月

用途：調(diào)節(jié)體液、電解質(zhì)及酸堿平衡。

注意事項(xiàng)：無菌溶液，含乳酸鈉、氯化鈉、氯化鈣等成分。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

八角楓（標(biāo)準(zhǔn)品） Strontium chloride, hexhydrate磷化埃茲蛋白抗體包裝100mg

八角茴香（標(biāo)準(zhǔn)品） Calcium sulfate, dihydrate嗜性粒陽離子蛋白抗體包裝100mg

八角蓮（標(biāo)準(zhǔn)品） dCMP, 2'-Deoxycytidine 5'-monophosphate, free acidE1A樣分化抑制因子3抗體包裝25mg

八角麻（標(biāo)準(zhǔn)品） DSS骨骼肌烯化抗體包裝1g

巴豆（標(biāo)準(zhǔn)品） Adenosine deaminase from calf spleen 15U/mg真核翻譯起始因子2C1抗體包裝25g

巴豆苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Alloxan, monohydrate磷化eIF4E結(jié)合蛋白抗體包裝5g

巴戟天（標(biāo)準(zhǔn)品） Ammonium citrate, dibasic附睪蛋白抑制蛋白包裝1g

巴森苷A；派立辛(標(biāo)準(zhǔn)品) Calcium (L)-lactate, pentahydrate內(nèi)皮B受體抗體包裝5g

巴西蘇木（標(biāo)準(zhǔn)品） dTMP, 2'-Deoxythymidine-5'-monophosphate disodium salt大腸桿菌脂多糖抗體包裝1g

芭蕉根（標(biāo)準(zhǔn)品） DulcitolGLP1類似蛋白Exendin4抗體包裝5g

菝葜皂苷元,知母皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品) Melezitose hydrate磷化真核翻譯起始因子4B抗體包裝100g

白當(dāng)歸腦(標(biāo)準(zhǔn)品) PEG 20000上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體包裝25g

白當(dāng)歸(標(biāo)準(zhǔn)品） 2-Aminothiazole磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝500g

白附子（獨(dú)角蓮）（標(biāo)準(zhǔn)品） Cerium (III) chloride, heptahydrate磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝1g

白果（標(biāo)準(zhǔn)品） D(+)-Arabitol磷化表皮生長因子受體抗體包裝1g

擬諾氏菌Nocardiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格：干品Purity≥98.0%絲/蘇激24試劑盒人參皂苷Rh3;ginsenoside

米舒青霉Penicillium│miczynskii 質(zhì)量規(guī)格：>65IU/MG,BR絲/蘇蛋白磷試劑盒人參皂苷Rh2;Ginsenoside

: K73/39資源名稱: 巴拿馬沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP31絲/蘇蛋白激PAK4試劑盒人參皂苷Rh1;Ginsenoside
乳酸鈉林格氏液SYVN1/FITC  熒光標(biāo)記滑膜凋亡抑制物1IgG

TNF- Alpha /Biotin  生物標(biāo)記 腫瘤壞死因子

T3/FITC  熒光標(biāo)記狀腺T3IgG

TACR3/NK-3 receptor /FITC  熒光標(biāo)記速激肽受體3IgG

TAK1/FITC  熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)化生長因子β活化激1IgG

Phospho-TAK1 (Ser412)/FITC   熒光標(biāo)記化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激1IgG

Phospho-TAK1 (Thr184)/FITC   熒光標(biāo)記化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激1IgG

Phospho-TAK1 (Thr187)/FITC  熒光標(biāo)記化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激1IgG