試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測(cè)定意義: 類黃酮是一類多苯化合物,屬于植物次生代謝物,對(duì)人體具有消炎,抗菌,降血脂,清除體內(nèi)羥自由基,預(yù)防癌癥等作用。 測(cè)定原理: 在堿性亞硝酸鹽溶液中,類黃酮與鋁離子形成在502nm處有特征吸收峰的紅色絡(luò)合物,測(cè)定樣品提取液在502nm處的吸光值,即可計(jì)算樣品類黃酮含量。 需自備的儀器和用品: 天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
商品屬性:
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP2)英文名:MCP2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144A抗體包裝25g
單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)英文名:MCP1 ELISA Kit周期B3抗體包裝1g
單氧化A(MAOA)英文名:MAOA ELISA Kit羧肽X(M14家族2)抗體包裝25g
存活(Surv)英文名:Surv ELISA Kit上皮鈣粘附分子結(jié)合蛋白E7包裝5g
簇集蛋白(CLU)英文名:CLU ELISA Kit周期D結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
促胰液(SCT)英文名:SCT ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白120抗體包裝5g
促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)英文名:TPPP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白23抗體包裝1g
促泌(SCGN)英文名:SCGN ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白89抗體包裝25g
刺猬因子相互作用蛋白(HHIP)英文名:HHIP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白30抗體包裝5g
次磷核糖基轉(zhuǎn)移1(HPRT1)英文名:HPRT1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體包裝5mg
雌激受體β(ERβ)英文名:ERβ ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白114抗體包裝100g
雌激受體α(ERα)英文名:ERα ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白39抗體包裝25g
垂體腺苷環(huán)化激活肽(ADCYAP1)英文名:ADCYAP1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白34抗體包裝25g
穿孔1(PRF1)英文名:PRF1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白75抗體包裝5g
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(FGFR3)英文名:FGFR3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白65抗體包裝25g
光硬皮馬勃Scleroderma│cepa Pers. 質(zhì)量規(guī)格:含量>98.5%,類白色粉末游離三狀腺原試劑盒鹽白屈菜紅堿;Chelerythrin
嗜鹽潮間帶桿菌Aestuariibacter│halophilus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP31游離肉堿銀杏;Ginkgolic acids
豬鏈球菌Streptococcus│suis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品游離前列腺特異性抗原試劑盒野菊花內(nèi)酯;Yejunualactone
植物類黃酮測(cè)試盒50管/48樣粟酒裂殖酵母 3-甲氧基-4-苯甲EB病早期抗原IgAElisa
鞘氨單胞 2--5-甲氧基苯甲蓖麻抗體Elisa
蜂房哈夫尼 1-異基哌β-乙型溶血性鏈球Elisa
食酸屬(噬酸屬) 1-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙酮弓形蟲Elisa
蘇云金芽孢桿 1-甲基-1h-咪唑-4-磺酰父系表達(dá)基因2Elisa
細(xì)交鏈孢霉 2,6-二氟苯膜結(jié)合型前列腺E合成1Elisa
產(chǎn)芽孢梭(生孢梭) 4-甲氧基-3-SCETINElisa
新疆糖單孢 2-羥基-3-硝基-5-氟吡啶角化生長(zhǎng)因子2Elisa
葡萄穗霉 7-氮雜-2-羧酸20S蛋白體Elisa
球黑孢霉 5--2-26S蛋白體Elisa
蠟狀芽孢桿 (R)-3-氟吡咯烷(HCL)HA tag標(biāo)簽Elisa
球形賴芽孢桿 (S)-(+)-3-氟吡咯烷鹽酸鹽系統(tǒng)性紅斑狼瘡Elisa
枇杷假尾孢 2,6-二氟甲酯沉默調(diào)節(jié)蛋白1Elisa
辣乳菇 5--2,4-二氟苯磺酰組織蛋白FElisa
蠟狀芽孢桿 4-(三氟甲基)-2-巰基嘧啶膽紅氧化代謝物Elisa