商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義 SDH(EC 1.1.1.14)催化山梨醇脫氫生成果糖,是調(diào)控生物體內(nèi)山梨醇含量的關(guān)健酶之一。測(cè)定原理SDH催化山梨醇脫氫生成果糖,同時(shí)還原NAD+生成NADH,測(cè)定340nm吸光度增加速率可以計(jì)算SDH活需自備的儀器和用品:紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
芥子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Neostigmine bromideLRRC59蛋白抗體包裝25g
芥子堿英文名: MagnolinLRRC41蛋白抗體包裝500g
芥子堿硫鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Racanisodamine促黃體生成受體抗體包裝100ml
金合歡;槐(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sulfadimethoxine sodium salt乳清蛋白α抗體包裝25ml
金蓮花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sulfadimethoxine sodium salt核纖層蛋白B2抗體包裝500ml
金毛耳草(黃毛耳草)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Digitoxigenin層粘蛋白α5抗體包裝1g
金錢草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: CorynoxineL-瓜抗體包裝250mg
金蕎麥(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Urapidil泌乳升高蛋白1抗體包裝25g
金雀花堿,野靛堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fusidate Sodium溶體相關(guān)膜蛋白4α抗體包裝5g
金石蠶苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fusidate Sodium分化相關(guān)基因14抗體包裝1g
金絲桃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 3,5-Diiodo-L-tyrosine dihydrateβ內(nèi)酰樣蛋白2抗體包裝5g
金絲桃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Flucloxacillin sodium神經(jīng)突觸粘附樣分子4抗體包裝1g
金松雙黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Parishin A可溶性半乳糖凝集3結(jié)合蛋白抗體包裝5g
金鐵鎖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Maslinic acid瘦抗體包裝25g
金銀花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2-Phenylbenzimidazole-5-sulfonic acid磷脂磷酯LPIN1抗體包裝5g
: 3007資源名稱: 山夫登堡沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR抗鞘磷脂抗體試劑盒番瀉苷C;Sennoside C
紫產(chǎn)色鏈霉菌Streptomyces│violochromogenes 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品抗鞘磷脂抗體試劑盒附子靈;Fuziline
季也蒙假絲酵母果生變種Candida│guilliermondii var. carpophila 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,AR抗鞘磷脂抗體試劑盒飛蓬酯乙;Erigoster B
山梨醇脫氫酶(SH)測(cè)試盒50管/48樣赭鱗蘑菇 2,6-二氟甲苯草酰乙酸Elisa
產(chǎn)氣腸桿 2-氟溶Elisa
簇生黃韌傘 胡椒NAD-蘋果酸Elisa
粉紅單端孢 4-羥基-3-甲氧基苯甲賴氨酰氧化2Elisa
灰樹花 5-氨基四氮唑賴氨酰氧化3Elisa
大腸埃希氏桿 2,4,6-三乙酸脂肪氧化3Elisa
華麗側(cè)耳(佛羅里達(dá)側(cè)耳) 3-氨基芐巨病Elisa
蘑菇 3-羥基-4-甲氧基苯甲核苷磷酸化Elisa
紅冬孢酵母 2-溴甲基-1,3-二氧戊環(huán)甘Elisa
寇氏隱甲藻 1,1-環(huán)己基二乙酸絡(luò)合合成Elisa
三葉草根瘤 5-羥基-L-色β-果糖苷Elisa
大腸埃希氏 3-溴-1-甲基-1,2,4-噻唑α-蛋白Elisa
靈芝 3-氟肉桂β-蛋白Elisa
腸膜明串珠 3-肉桂角鯊烯合成Elisa
假單胞 對(duì)甲基肉桂香葉基香葉基焦磷酸合Elisa