詳細介紹
產品分類:骨組織染色
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:又稱戈德納三色染色液,主要用于骨組織染色。
注意事項:可不脫鈣染色,可用MMA塑料包埋,脫塑后直接染色。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
Goldner三色染色液 | 6×50ml | FS-R6699 |
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
桑辛;桑根皮(標準品) Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid)胰高血糖樣肽2受體抗體包裝1g
桑葉(標準品) N-Methyliminodiacetic Acid生長休止特定蛋白1抗體包裝5g
桑枝(標準品) Nitrilotriacetic Acid Disodium Saltγ-谷酰轉移輕鏈1抗體包裝25g
沙蟾精-3-辛二半酯 N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acidγ1基丁受體α5/GABRα5抗體包裝5g
沙棘(標準品) Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic AcidG蛋白激活內向通道1抗體包裝200mg
沙棘膏(標準品) TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]G蛋白激活內向通道3抗體包裝100g
沙苑子(標準品) Dimethylsulfonazo IIIG蛋白偶聯(lián)受體48抗體包裝25g
沙苑子苷(標準品) Sulfonazo III 糖基轉移GLT8D2抗體包裝500g
沙苑子苷A(標準品) 3sodium 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate高爾基體外周膜蛋白p65抗體包裝100g
砂仁(陽春砂)(標準品) 2,2'-Dihydroxyazobenzene核因子GCNF/維受體相關受體抗體包裝500g
山茶甙A StilbazoG蛋白轉錄因子α2/Gα t2抗體包裝5g
山茶甙B Lumogallion 脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝100mg
山茶苷A Disodium Bathocuproinedisulfonate脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝500mg
山豆根(標準品) Bathophenanthrolinedisulfonic Acid Disodium Salt Hydrate脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝1g
山風(標準品) Bathocuproine (purified by sublimation)轉錄因子Gli2抗體包裝1g
鐮孢Fusarium│sp. 質量規(guī)格:>99%腦腸肽試劑盒3-O-咖啡酰奎寧;3-O-caffe
黃曲霉Aspergillus│flavus 質量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品囊蟲病抗體試劑盒輪環(huán)藤寧;Cyclen
靈芝(赤芝,紅靈芝)Ganoderma│lucidium 質量規(guī)格:>99%,USP31難辨梭狀芽孢桿菌B試劑盒龍膽山;Bellidifolin
Goldner三色染色液ROCK2 (Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2) Rho相關蛋白激mei2抗原規(guī)格: 0.5mg
RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha) 核受體RXRα抗原規(guī)格: 0.5mg
S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-磷suan山脫氫mei抗原規(guī)格: 0.5mg
S0B S0B蛋白抗原規(guī)格: 0.5ml
S0B(S0 calcium binding protein B)(human, mouse, rat, bovine, Rabbit, chicken) S0B蛋白多肽規(guī)格: 0.5mg