試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測(cè)定意義還原糖廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。植物體內(nèi)的還原糖主要包括葡萄糖、果糖和麥芽糖等,是最常見(jiàn)的單糖和雙糖,其中葡萄糖和果糖不僅是呼吸作用的主要底物,也是進(jìn)一步合成蔗糖、淀粉和纖維素的底物。測(cè)定原理加熱促進(jìn)堿性溶液中3,5-二硝基水楊酸溶液與還原糖生成棕紅色氨基化合物,在540nm有特征吸收峰;在一定的濃度范圍內(nèi),還原糖含量與540nm吸光度成線性關(guān)系,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,即可求出樣品中還原糖的量。需自備的儀器和用品可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、蒸餾水。 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 還原糖含量測(cè)試盒50管/24樣 |
檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產(chǎn)品貨號(hào) | AS6321239 |
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
長(zhǎng)春瑞濱(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Salinomycin磷脂酰基轉(zhuǎn)移2抗體包裝1g
長(zhǎng)春質(zhì)堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: CurculigosideLRRFIP2蛋白抗體包裝25g
救必應(yīng)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Paeonolide巨噬調(diào)控相關(guān)蛋白LRRFIP1抗體包裝5g
桔梗(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: oxysophoridine促黃體生成抗體包裝1g
桔梗皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Securinine整合和生長(zhǎng)因子樣蛋白1抗體包裝25mg
桔梗皂苷D3英文名: Polygalaxanthone III相似腫瘤抑制基因HUGL抗體包裝250mg
桔梗皂苷E英文名: WtlfordineLAMTOR1蛋白抗體包裝10mg
桔梗皂苷G1英文名: Tributyltetradecylphosphonium chlorideLIM結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白3抗體包裝25g
桔梗皂苷元英文名: mogroside ⅢA1 ILK結(jié)合蛋白LIMS2抗體包裝5g
桔梗皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名: mogroside II A2淋巴特異性接頭蛋白抗體包裝1g
桔紅;桔皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: mogroside III e表面免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子4抗體包裝25g
菊花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Grosvenorine淋巴抗原6重復(fù)位點(diǎn)蛋白G6F抗體包裝5g
菊苣(毛菊苣)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Piceatannol樁蛋白抗體包裝1g
菊苣英文名: Magnesium chloride脂蛋白受體相關(guān)蛋白/低密度脂蛋白相關(guān)蛋白的相關(guān)蛋白1抗體包裝250mg
菊苣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tricin皮屑樣蛋白2抗體包裝5g
廈門(mén)鏈霉菌Streptomyces│xiamenensis 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR抗旁瘤抗原Ma2試劑盒泛鈣;Calcium pantothe
惡臭假單胞菌Pseudomonas│putida 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定抗凝脂試劑盒3,6′-二芥子?;崽?3,′6-d
ATCC27562=CDCB9629=CGMCC1.1758資源名稱: 創(chuàng)傷弧菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,EP7.3,BR抗凝脂試劑盒芳樟;Linalool
還原糖含量測(cè)試盒50管/24樣Flavobacterium 2-溴-2',6'-二氟苯乙酮植物特異性脂轉(zhuǎn)移蛋白Elisa
微紅微球 2--3-硝基-6-半胱蛋白3Elisa
根瘤屬 酮二酸褪綠矮化病Elisa
糞產(chǎn)堿糞亞種 2,2-二乙氧基氧化還原Elisa
異常畢赤酵母 2-甲酸甲酯精脫亞Elisa
大腸埃希氏 2,3,4,5-四氟苯精脫亞Elisa
氣生馬賽 2-溴烯二氫玉米Elisa
褐橙指孢囊 2-乙順式玉米核苷Elisa
鴨疫里氏桿 2-氨基-5-羥基吡啶異戊烯基腺9-糖苷Elisa
灰色鏈霉 2-氨基苯酸異戊烯基腺核苷Elisa
膠凍樣芽胞桿 L-芐酯鹽酸鹽異戊烯基腺7-糖苷Elisa
沙福芽孢桿 2,4-二酸脫氫抗壞血酸;氧化型抗壞血酸Elisa
海小單孢 醋甲唑質(zhì)膜氫-ATPElisa
阿氏芽孢桿 1H-四氮唑-5-甲酸乙酯無(wú)機(jī)焦磷酸Elisa
木荷生德克斯酵母 3-溴-2--4-多不飽和脂肪酸Elisa