改良Gomori三色染色液公司正在銷售的產品：豚鼠肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)試劑盒 Anti-NR1H3 Antibody磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體
豚鼠胃泌素抑制肽(GIP)試劑盒 Anti-NR1H4 Antibody磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體
豚鼠波形蛋白(VIM)試劑盒Anti-NR1I2 Antibody核糖核蛋白抗原抗體
豚鼠成纖維生長因子4(FGF4)試劑盒 Anti

產品分類：結締染色

儲存條件：4℃,避光,6個月

用途：又稱MGT染色液。肌肉活檢，肌纖維呈青綠色，膠原纖維呈亮綠色，細胞核呈紫色，線粒體呈紅色。

注意事項：新鮮材料盡快進行冰凍切片。Gomori染色液應冰箱內存放，超過有效期建議丟棄以保證染色鮮亮。分化時間應根據(jù)染液配制時間適當調整，時間越長，分化時間約短。

公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！

 

配制與標定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

土荊皮乙(標準品) 2'-Deoxyguanosine monohydrate透明質合成3抗體包裝250mg

土壟大白蟻巢（標準品） 2'-Deoxycytidine;2'-dC熱休克蛋白56抗體包裝1g

土木香（標準品） 2'-Deoxycytidine;2'-dC熱休克蛋白70相互作用蛋白抗體包裝5g

土木香內酯（標準品） 2'-Deoxyadenosine monohydrate熱休克蛋白相關蛋白4抗體包裝100g

土牛膝（標準品） DNA, Fishsperm透明質合成2抗體包裝25g

兔耳草（標準品） DNA from salmon sperm 同源盒基因HOXA3蛋白抗體包裝5g

菟絲子（南方菟絲）（標準品） 5-Fluoro-2'-deoxycytidine同源盒基因HOXA4蛋白抗體包裝1g

蛻皮激（標準品） 5-Fluoro-2'--deoxyuridine同源盒基因HOXA6蛋白抗體包裝25g

脫落(標準品) Guanosine同源盒基因HOXA7蛋白抗體包裝5g

脫氫齒孔 Guanosine羥基類固(17β)脫氫4/17β-HSD4抗體包裝1g

脫氫紫堇堿;去氫紫堇堿（標準品） GDP Disodium Salt血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體包裝100g

脫內酯(標準品) SU-11274血紅結合蛋白1抗體包裝25g

脫內酯琥珀半酯(標準品) Uridine血紅蛋白α抗體包裝500g

脫羊藿(標準品) Uridine結合球蛋白β抗體包裝100g

脫氧熊果苷(標準品) UTP, Trisodium Salt海馬豐富基因轉錄蛋白1抗體包裝25g

蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品免疫球蛋白重鏈可變區(qū)試劑盒遼東楤木皂苷Ⅹ;Araloside X

三隔鐮刀菌Gibberella│tricincta El-Gholl McRitchie Schoult. & Ridings 質量規(guī)格：>99%免疫球蛋白重鏈試劑盒硫辛;Lipoic acid

鏈孢囊菌Streptosporangium│sp. 質量規(guī)格：HPLC>99%,標準品免疫球蛋白輕鏈lambda試劑盒羅丹明B;Rhodamine B
改良Gomori三色染色液TIEG1/KLF(TGF-beta inducible early response gene 1)  TGF-β誘導早期應答基因1抗原規(guī)格： 0.5mg

TGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I)  轉移生長因子–β受體1抗原規(guī)格： 0.5mg

Thioredoxin 1(ERdj5)  硫氧還蛋白抗原規(guī)格： 0.5mg

Tie1/JTK14 peptide  上皮生長因子樣域酪氨suan激mei1抗原規(guī)格： 0.5mg

Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2)  上皮生長因子樣域酪氨suan激mei2抗原規(guī)格： 0.5mg