公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義 APX是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一,也是抗壞血酸代謝的關(guān)鍵酶之一。APX具有多種同功酶,分別定位于葉綠體、胞質(zhì)、線(xiàn)粒體、過(guò)氧化物和乙醛酸體,以及過(guò)氧化體和類(lèi)囊體膜上。APX 催化 AsA 還原 H2O2,是 植物AsA 的主要消耗者。APX的活性直接影響到AsA的含量,在脅迫和解脅迫條件下,APX與AsA具有一定的負(fù)相關(guān)性。 測(cè)定原理 APX 催化 AsA 還原 H2O2,通過(guò)測(cè)定AsA的氧化量可計(jì)算得APX活力。 實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備 研缽、冰、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1ml石英比色皿、移液槍、雙蒸水。 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線(xiàn)0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類(lèi)SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)英文名:IGFBP6 ELISA Kit磷化EGF應(yīng)答因子1抗體包裝25g
胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)英文名:IGFBP4 ELISA Kitβ抗體包裝5g
胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)英文名:IGFBP3 ELISA Kit磷化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體包裝25g
胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)英文名:IGFBP2 ELISA KitARF鳥(niǎo)苷交換因子BIG1抗體包裝5g
胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)英文名:IGFBP1 ELISA Kit腦特異性同源蛋白BSX抗體包裝1g
胰島樣生長(zhǎng)因子2(IGF2)英文名:IGF2 ELISA Kit鋅指蛋白47抗體包裝25g
胰島樣生長(zhǎng)因子1(IGF1)英文名:IGF1 ELISA Kit?BTBD14A蛋白抗體包裝5g
胰島樣蛋白6(INSL6)英文名:INSL6 ELISA Kit鋅指蛋白851抗體包裝25g
胰島樣蛋白5(INSL5)英文名:INSL5 ELISA Kit嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體包裝5g
胰島樣蛋白3(INSL3)英文名:INSL3 ELISA Kit磷化c-fos抗體包裝100g
胰島受體底物2(IRS2)英文名:IRS2 ELISA Kit磷化c-fos抗體包裝25g
胰島受體底物1(IRS1)英文名:IRS1 ELISA Kit磷化原癌基因c-Jun抗體包裝500g
胰島受體(ISR)英文名:ISR ELISA Kit磷化原癌基因c-kit抗體包裝5ml
一氧化氮合運(yùn)輸因子(NOSTRIN)英文名:NOSTRIN ELISA Kit1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框148抗體包裝1g
葉受體1(FOLR1)英文名:FOLR1 ELISA Kit性T抗原-4抗體包裝5g
去整合樣金屬蛋白23抗體白介21(IL21)MK-801 (Dizocilpine) is a potent N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor antagonist
抗壞血酸過(guò)氧化物酶(APX)測(cè)試盒50管/48樣球孢毛霉 2-吡啶甲酰視黃酸Elisa
類(lèi)芽胞桿 2,5-二溴-3-吡啶視錐蛋白樣蛋白1Elisa
腐霉 噻唑-5-甲酸嗜鉻粒蛋白AElisa
芽孢桿屬 咪唑-2-甲酸嗜環(huán)蛋白;親環(huán)AElisa
側(cè)耳 2-巰基嘧啶嗜環(huán)蛋白;親環(huán)BElisa
果生鏈核盤(pán) (3,5-二甲基吡唑-1-基)乙酸嗜酸粒趨化蛋白Eotaxin 1Elisa
貝倫格葡萄座腔 坎地沙坦酯嗜酸活化趨化因子3Elisa
大腸埃希氏 1-甲基-1H-吡唑-5-羧酸嗜酸性粒趨化蛋白Elisa
微黃漢納酵母 2--9,9-二甲基芴嗜酸性粒趨化蛋白Elisa
豬丹絲 4-溴-3-甲酸乙酯嗜酸性粒陽(yáng)離子蛋白Elisa
硬結(jié)節(jié)桿 2-溴-5-甲苯嗜異性抗體Elisa
大腸桿屬 2,5,6-三氨基-4-磺酸基嘧啶受體TNFRSF結(jié)合絲蘇激2Elisa
pcDNA6/V5-His A 2,8-二喹啉-3-甲瘦Elisa
叢花青霉 N-甲基-1-萘瘦受體Elisa
棉花新鞘氨 2-(2-甲氧基乙氧基)乙酸舒Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。