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詳細介紹
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹：
測定意義 PDH（EC 4.1.1.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，是丙酮酸脫氫酶復(fù)合體(PDHC)催化丙酮酸氧化脫羧的限速酶，催化丙酮酸脫梭生成羥乙ji-TPP，把糖酵解和三羧酸循環(huán)連接起來。 測定原理PDH催化丙酮酸脫氫，同時還原WST-8產(chǎn)生黃色物質(zhì)，從而導(dǎo)致450nm光吸收的增加?？梢姺止夤舛扔?酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/96樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321143 |
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照血清（漿）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
5-羥色鹽鹽（標準品）英文名： Potassium bicarbonate轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體包裝500g
6'''-阿魏酰斯皮諾英文名： Sodium dodecanesulfonate內(nèi)皮受體蛋白酪激抗體包裝250mg
6''-O-二?；玖夏拒沼⑽拿?Theophylline酪蛋白激受體B2抗體包裝1g
6''-二沙苑子苷單酯英文名： Cellulase磷化雌激受體ER alpha 抗體包裝5g
6'-O-β-D-葡萄糖基龍膽苦苷英文名： Chondroitin sulfate重組增強型綠色熒光蛋白抗體包裝25ml
6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷英文名： Isonicotinic acid雌激受體α抗體（用于western blot）包裝5ml
6,7,4'-三羥基異黃英文名： L-Malic acid雌激受體α/β抗體包裝25g
6-氧基二氫血根堿英文名： Proteinase K Solution, 20 mg/ml自分泌運動因子抗體包裝5g
6-氧基山柰-3-O-蕓香糖苷英文名： Poly-L-lysine solution ( 0.1%)酪蛋白激A3受體抗體包裝100ml
6-姜(姜辣)英文名： Tetracycline hydrochloride solution, 50 mg/ml, sterileEHM2蛋白抗體包裝1g
6-姜烯（標準品）英文名： D-Glucose-6-phosphate, disodium, dihydrate磷化真核翻譯起始因子4E抗體包裝1g
6-羥基(標準品)英文名： Sodium succinate翻譯延伸因子EF-1a抗體包裝5g
6-基異麥冬黃烷A(標準品)英文名： Hemoglobin磷化雌激受體α抗體包裝1g
7,4'-二羥基黃（標準品）英文名： PEG 10000磷化表皮生長因子受體抗體包裝1g
7,8-二氫生物蝶呤英文名： DL-Malic acid磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝5g
JCM3170=ATCC27875=CBS420.74=CECT3304=DSM4資源名稱: 披發(fā)糖多孢菌披發(fā)亞種 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品髓性核分化抗原試劑盒肉豆蔻;Myristicin
瓦克青霉Penicillium│waksmanii 質(zhì)量規(guī)格：純度大于99%,R構(gòu)型髓系觸發(fā)受體-1試劑盒忍冬苷;Lonicerin
ATCCBAA-482=CCM7143=CIP106688=DSM15638=NC資源名稱: 低溫乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體試劑盒日蟾蜍他靈;Gamabufotalin
丙酮酸脫氫酶（PDH)測試盒100管/96樣枯草芽孢桿 2--5-吡啶酪蛋白激受體ErbB4Elisa
奇異鏈霉 (S)-N-芐氧羰基-3-氨基-3-苯基-1-磷酸化酪蛋白激受體ErbB2Elisa
芽孢桿屬 1-辛烯-3-乙酸酯磷酸化酪蛋白激受體ErbB4Elisa
釀酒酵母 吡咯并[2,3-D]嘧啶-4(氫)-酮SMO同系物Elisa
球孢白僵 2,3,5-三氟芐γ分泌Elisa
灰黃淺黃酵母 2,4-二甲基吡咯-3,5-二羧酸乙酯鈣粘連蛋白Elisa
瘡痂病鏈霉 2,3,5-三氟苯乙鎂離子轉(zhuǎn)運蛋白1Elisa
Corynebacterium sp. 4-溴-alpha-苯乙趨化Elisa
薄層屬 1H-吡咯并[2,3-C]吡啶-2-羧酸乙酯膽固-25-羥化Elisa
總狀毛霉 1,1,2-氧基乙烷載脂蛋白MElisa
土壤短芽胞桿 Belleau's試劑法尼酯X受體Elisa
米根霉 -1-乙酸肝三酰甘油脂肪Elisa
頭孢霉 索那新果糖激Elisa
黑曲霉 2-(苯磺酰基)吡啶抗凝血原抗體Elisa
迂回殼囊孢 環(huán)己基肼鹽酸鹽蛋白酪磷酸Elisa
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