詳細介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定意義 纖維素酶是由微生物產(chǎn)生的多組分的酶系,能水解纖維素β-1,4葡萄糖苷鍵生成葡萄糖,濾紙酶是其中的一個組分,研究濾紙酶活力對纖維素酶的研究具有非常重要的意義。 測定原理 濾紙酶水解濾紙產(chǎn)生的還原糖能與3,5-二硝基水楊酸生成紅棕色氨基化合物,在540nm處有最大光吸收,在一定范圍內(nèi)反應液顏色深淺與還原糖的量成正比,可測定計算得濾紙酶的活力。 自備實驗用品及儀器 天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321251 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
全蝎(標準品)英文名: 無磷化蛋白激MST1抗體包裝1g
全葉青蘭(標準品)英文名: Neferine多藥耐藥相關蛋白9抗體包裝250mg
拳參(標準品)英文名: 5-O-Methylvisammioside基質(zhì)金屬蛋白-2抗體包裝5g
染料木苷(標準品)英文名: N-Methylcytisine基質(zhì)金屬蛋白2抗體包裝1g
染料木/金雀異黃(標準品)英文名: 9-Methoxycamptothecin有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白1抗體包裝100g
人參(標準品)英文名: 10-Gingerol有絲分裂阻滯缺陷蛋白2抗體包裝25g
人參二(標準品)英文名: 6-gingerolβ2微球蛋白抗體包裝5g
人參莖葉(標準品)英文名: 8-Gingerol磷化神經(jīng)上皮酪激/癌激10抗體包裝1g
人參蘆頭(標準品)英文名: ZingeroneE3連接MMS21蛋白抗體包裝5g
人參三(標準品)英文名: Zingerone環(huán)指蛋白60抗體包裝100g
人參皂苷CK(標準品)英文名: 6-Shogaol肌球蛋白輕鏈7抗體包裝25g
人參皂苷F1(標準品)英文名: Gypenoside XLIX心臟肌球蛋白結合蛋白抗體包裝5g
人參皂苷F2(標準品)英文名: YM201636肌球蛋白重鏈9抗體包裝1g
人參皂苷F3(標準品)英文名: Poliumoside髓系/淋巴或混合型白血病11抗體包裝25g
人參皂苷F4,人參皂苷Rg4(標準品)英文名: Hyperoside干擾誘導GTP結合蛋白MX2抗體包裝5g
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:純度99%抗副流感病IgM抗體試劑盒大黃-8-O-β-D-葡萄糖苷;Rhe
嗜寡養(yǎng)單胞菌Stenotrophomonas│acidaminiphila 質(zhì)量規(guī)格:>95%抗副流感病IgG抗體試劑盒豆腐果苷;Helicid
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,USP可用于培養(yǎng)抗父體淋巴性抗體試劑盒丁東莨菪堿;Scopolamine
濾紙酶測試盒100管/48樣枯草芽胞桿 4-噠羧酸雌二受體Elisa
釀酒酵母 溴化1-基-3-甲基咪唑雌Elisa
朱紅叢赤殼 6-甲巰基雌Elisa
長雙歧桿 二十四烷雌受體Elisa
小單孢 次氮基三乙酸三鈉鹽促紅生成受體Elisa
枯草芽孢桿 4-溴-3-苯甲促甲狀腺Elisa
釀酒酵母 3--2-氟甲苯促甲狀腺釋放Elisa
孢籃狀 3-甲酰促卵泡Elisa
殼 1-芐基-3-酮鹽酸鹽促腎上腺皮質(zhì)釋放Elisa
干草寒冷桿 5-溴-2-(甲巰基)-4-嘧啶甲酸促腎上腺皮質(zhì)Elisa
大腸埃希氏 1-溴-4--2,5-二促腎上腺皮質(zhì)釋放因子Elisa
沼澤紅假單胞 1-芐基-3-甲酸甲酯促生長釋放Elisa
納塔爾鏈霉 2-氟-6-羥基吡啶促性腺釋放Elisa
大腸埃希氏 異植物催產(chǎn)Elisa
四脊裸胞殼 2,4-二氟二苯甲酮催乳Elisa