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公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
鉛鹽染色液 | 2×50ml | FS-R7129 |
產品分類:金屬及鹽染色
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:鉛染色
注意事項:又稱玫瑰紅酸鈉、Rhodizonate法,該法常用,鉛鹽呈黑色,避免采用含汞的固定液。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
香菇死亡相關蛋白6/Fas死亡區(qū)相關蛋白抗體Human LARP7(La-related protein 7) ELISA Kit人單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫試劑盒
木生炭角菌動力蛋白2抗體Human DDX42(ATP-dependent RNA helicase DDX42) ELISA Kit人單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒
冷海水黃桿菌防御β2/Defensin β2抗體Human COL10A1(Collagen alpha-1(X) chain) ELISA Kit人單純皰疹病抗原-1(HSV-Ag1)免疫試劑盒
杏鮑菇多巴受體相互作用蛋白5抗體Human SORD(Sorbitol dehydrogenase) ELISA Kit人單純皰疹病Ⅱ型抗體IgM(HSVⅡ-Ab)免疫試劑盒
乳酒假絲酵母性發(fā)育轉錄因子蛋白DMO抗體Human ZEB1(Zinc finger E-box-binding homeobox 1) ELISA Kit人單純皰疹?、蛐涂贵wIgG(HSVⅡ-Ab)免疫試劑盒
側耳無胸腺癥關鍵蛋白6樣抗體(迪格爾格綜合征)Human DTNBP1(Dysbindin) ELISA Kit人單純皰疹病Ⅰ型(HSVⅠ)抗體(IgM)免疫試劑盒
蠟蚧菌軸絲動力蛋白10抗體Human MTOR(Serine/threonine-protein kinase mTOR) ELISA Kit人單純皰疹?、裥?HSVⅠ)抗體(IgG)免疫試劑盒
釀酒酵母D型天冬抗體Human ZEB2(Zinc finger E-box-binding homeobox 2) ELISA Kit人單純皰疹病Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgM)免疫試劑盒
繡球菌*DYDC1蛋白抗體Human OTC(Ornithine carbamoyltransferase, mitochondrial) ELISA Kit人單純皰疹?、?Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgG)免疫試劑盒
根瘤菌屬二氫嘧啶抗體Human CA3(Carbonic anhydrase 3) ELISA Kit人單氧化(MAO)免疫試劑盒
黑腐皮殼脫磷結構域蛋白抗體Human ISG15(Ubiquitin-like protein ISG15) ELISA Kit人帶3蛋白(Band3)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌DCST1蛋白抗體Human AMFR(E3 ubiquitin-protein ligase AMFR) ELISA Kit人大皰性類天皰瘡抗體(BP)免疫試劑盒
黑曲霉DCUN1D4蛋白抗體Human DDX42(ATP-dependent RNA helicase DDX42) ELISA Kit人大內皮(Big ET-1)免疫試劑盒
土生類諾氏菌脫氧輔合蛋白抗體Human OCLN(Occludin) ELISA Kit人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)免疫試劑盒
鏈霉菌短鏈脫氫/還原家族4樣2蛋白抗體Human LARP7(La-related protein 7) ELISA Kit人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)免疫試劑盒
無花果曲霉DDRGK1蛋白抗體Human COL10A1(Collagen alpha-1(X) chain) ELISA Kit人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)免疫試劑盒
副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質量規(guī)格:分析標準品,用于食品分析醋棉
幽門螺桿菌Helicobacter│pylori 質量規(guī)格:分析標準品,>99%(GC)柚皮苷二氫查爾
灰平鏈霉菌Streptomyces│griseoplanus Backus et al. 質量規(guī)格:分析標準品山姜
鉛鹽染色液ATM(Human Ataxia telangiectasia mutated) ELISA Kit 人毛細血管擴張性共濟失調突變基因規(guī)格: 48T
AhR(Human aryl hydrocarbon receptor) ELISA Kit 人芳香烴受體規(guī)格: 48T
SMAF(Human Specifie Macrophage Arming Paetot) ELISA Kit 人特異性巨噬細胞武裝因子規(guī)格: 48T
MF/MPF(Human maturation promoting factor) ELISA Kit 人促有絲分裂因子規(guī)格: 48T
ATF-1(Human activating transcription factor-1) ELISA Kit 人轉錄因子-1規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。