商品介紹:
商品介紹 研究意義 GSH/GSSG是細(xì)胞內(nèi)最重要的氧化還原對(duì)之一。因此,測(cè)定細(xì)胞內(nèi)GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細(xì)胞所處的氧化還原狀態(tài)。 測(cè)定原理 DTNB與GSH反應(yīng)生成復(fù)合物,在412nm處有特征吸收峰;其吸光度變化與GSH含量成正比。 實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備 可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1ml比色皿、雙蒸水 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類(lèi)SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
β萘(β-Nph)英文名:β-Nph ELISA Kit絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體包裝100g
β萘(β-naphthol)英文名:β-naphthol ELISA Kit抗凝血3抗體包裝25g
β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)英文名:β-Cat ELISA Kit人血清白蛋白單克抗體包裝5g
β干擾(IFN-β/IFNB)英文名:IFN-β/IFNB ELISA Kit載脂蛋白A4抗體包裝1g
β干擾(IFNβ)英文名:IFNβ ELISA Kit磷化Rho鳥(niǎo)苷交換因子2抗體包裝25g
β甘露糖苷(β Manase)英文名:β Manase ELISA Kit磷化絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體包裝5g
β-防御3(β-BD-3)英文名:β-BD-3 ELISA Kit肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型1A抗體包裝250mg
β防御2(β-BD-2)英文名:β-BD-2 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白32抗體包裝1g
β-防御1(β-BD-1)英文名:β-BD-1 ELISA Kit共濟(jì)失調(diào)7樣蛋白3B抗體包裝5g
β-防御(β-DF)英文名:β-DF ELISA Kit感染性蛋白蛋白1抗體包裝1g
β防御(β-Defensin)英文名:β-Defensin ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族5抗體包裝5g
β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)英文名:Aβ1-42 ELISA Kit植物生長(zhǎng)激ABP1抗體包裝100g
β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)英文名:Aβ1-40 ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體包裝25g
β半乳糖苷(βGAL)英文名:βGAL ELISA Kitalpha 1腎上腺能受體B抗體包裝5g
β基己糖苷A(β-Hex A)英文名:β-Hex A ELISA KitBcl2 alpha蛋白抗體包裝100mg
磷化鈉ATP蛋白a1抗體趨化因子C-C-基元配體4樣蛋白1(CCL4L1)SRPIN340 is a selective SRPK inhibitor with Ki of 0.89 μM for SRPK1, showing no
還原型谷胱甘肽(GSH)測(cè)試盒50管/48樣淡紫擬青霉 (S)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基-甲抗血小板IgG抗體Elisa
麥芽糖假絲酵母 2-氟-3-溴-5-硝基吡啶抗血小板IgM抗體Elisa
莖點(diǎn)霉屬 3,4-二芐溴抗胰島受體抗體Elisa
香菇 二溴氟抗乙型肝炎病表面抗體Elisa
蘇云金芽孢桿殺蟲(chóng)亞種 1-Boc-4-乙基-4-甲酸抗載脂蛋白抗體A1Elisa
釀酒酵母 2,4-二甲氧基吡啶抗中性粒胞漿抗體Elisa
豌豆根瘤 5-溴-2-甲基-4-硝基-1H-咪唑抗中性粒核周抗體Elisa
假黃色單胞 2,6-二喹喔啉抗中性??贵wElisa
毛木耳 反-4,4'-二溴芪抗中性??贵wElisa
堆形艾耳球蟲(chóng) 3-苯基-2-烯酸-2-烯基酯顆粒BElisa
乳酸片球 溴化1-癸基-3-甲基咪唑顆粒溶Elisa
分枝節(jié)桿 2-氟-3-甲基-5-顆粒體蛋白Elisa
短裙竹蓀3-3 4-溴-2-氟芐Elisa
紡錘形擬酵母 3-溴-2-甲基-5-硝基吡啶可溶程序性死亡分子-1Elisa
蒂莫內(nèi)馬賽 啶??扇苄曾B(niǎo)苷酸環(huán)化Elisa