公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: NO(Nitric Oxide,NO)廣泛分布于生物體內(nèi)神經(jīng)、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng)中,特別是神經(jīng)組織中較豐富。它作為細(xì)胞間及細(xì)胞內(nèi)的信息物質(zhì),發(fā)揮信號(hào)傳遞的作用,是一種新型的生物信使分子,在機(jī)體的生理、病理過(guò)程中起著重要的作用。 測(cè)定原理: NO在體內(nèi)或水溶液中極易氧化生成NO2—,在酸性條件下,NO2—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進(jìn)一步與萘基乙烯基二胺偶合,產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰,測(cè)定其吸光值,可以計(jì)算NO含量。為了排除樣品色素等的影響,每個(gè)樣品需做對(duì)照管。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
Drospirenone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tigecycline整合αM/巨噬表面分子抗體包裝10g
Dutasteride(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tigecycline血小板內(nèi)皮黏附分子-1抗體包裝50g
Epinephrine hydrochloride(標(biāo)...英文名: Tilmicosin血小板內(nèi)皮黏附分子1抗體包裝1g
Estradiol Benzoate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: TilmicosinCD34抗體包裝25MG
Estradiol Cypionate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Timolol MaleateCD36抗體包裝100ml
Estradiol Enanthate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Timolol Maleate凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體包裝25ml
Estradiol Valeate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tinidazole凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體包裝5g
Estriol(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tinidazole凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體包裝25g
Estrone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tobramycin Base4號(hào)染色體開放閱讀框34抗體包裝5g
Ethiny Estradiol(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tobramycin Base酪蛋白激1γ3/CKI γ3抗體包裝25g
Ethisterone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tobramycin Sulfate凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體包裝5g
Etoposide(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tobramycin Sulfate膽固氧化抗體包裝250mg
Fasudil hydrochloride(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tolnaftate半胱蛋白蛋白14抗體包裝1g
Fenofibrate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Topotecan HCl半胱蛋白蛋白5抗體包裝5g
Fenofibric acid(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Topotecan HCl豬瘟病抗體包裝1g
: Z332資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR血栓A2試劑盒g(shù)薟精;Darutigenol
曲霉Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血栓前體蛋白試劑盒β-細(xì)辛腦;β-Asarone
澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0% ,合物血清淀粉樣蛋白P試劑盒a-細(xì)辛;a-Asarone
NO含量測(cè)試盒100管/96樣土庫(kù)曼鹽土生古 7-溴-1-異喹啉半胱蛋白3Elisa
皺孢鏈霉 4-嗎啉基芐S轉(zhuǎn)移π1Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 2-乙?;?5-溴吡啶S轉(zhuǎn)移π1Elisa
釀酒酵母 3--4-硝基茴香蛋白激RElisa
發(fā)酵乳桿 2--4-甲可溶性EPO受體Elisa
德沃斯氏 3--4-甲肝臟甘油三脂脂肪Elisa
枯草芽孢桿 4-溴-2-氟苯磺酰結(jié)核分枝桿Elisa
產(chǎn)色鏈霉 3-基-4-氟苯酸膜聯(lián)蛋白-A3Elisa
大腸埃希氏桿 3-氨基-2-甲基酸水合物1-羥基芘Elisa
解淀粉芽孢桿 2-氨基-3-基-4,5-二甲基吡咯乙酰肝硫酸鹽Elisa
小鏈霉 酞酸血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體Elisa
米根霉 2-(十八氧基)乙梅螺旋體IgM抗體Elisa
大腸埃希 2-氨基-3-基-4,5-二甲基吡咯梅螺旋體Igg抗體Elisa
芽孢桿 酞酸信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子5Elisa
草色串孢 2-(十八氧基)乙磷酸化信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子5Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。