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植物酸性磷酸酶提取試劑

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更新時間:2022-07-05 09:19:26瀏覽次數(shù):293

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100ml
貨號 FS-R6546 應用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6546
植物酸性磷酸酶提取試劑公司正在銷售的產(chǎn)品:兔絲裂原激活蛋白激酶(MAPK)試劑盒 Anti-Glycine decarboxylase/GLDC Antibody沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體
兔生長分化因子9(GDF9)試劑盒Anti-GLRX3 Antibody磷酸化沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體
兔血管生成素4(ANGPT4)試劑盒 Anti-GNAQ Antibody磷酸化鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體
兔錨

詳細介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

植物酸性磷酸酶提取試劑

100ml

FS-R6546

產(chǎn)品分類:細胞組分分離

儲存條件:室溫,12個月

用途:用于裂解植物組織,提取植物中的酸性磷酸酶

注意事項:酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)分布極廣泛,遍布各種組織,主要存在于細胞的溶酶體內(nèi),所以常作為溶酶體標志酶。溶酶體外的酸性磷酸酶存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和胞質(zhì)內(nèi),各種動物中的酸性磷酸酶各有不同,酸性磷酸酶的適宜pH為4.5~5.5。

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

賴匹林(標準品) Pitavastatin Calcium /NK-104環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體包裝250mg

賴脯胰島(標準品) Pitavastatin Calcium /NK-1043號染色體開放閱讀框30抗體包裝100g

(標準品) Potassium iodideCX3CL1抗體包裝1g

蘭索唑(標準品) Praziquan脫羧蛋白體36抗體包裝25g

樂鹽鹽(標準品) Praziquan3號染色體開放閱讀框78抗體包裝5g

雷貝唑鈉(標準品) Prazosin HCl過敏C5a/補體C5a抗體包裝1g

(標準品) Prednisolone acetate卵巢癌抗原抗體包裝5g

雷諾(標準品) Prednisone Acetate粘附分子相關(guān)蛋白a1抗體包裝1g

雷帕霉/(標準品) Prednisone Acetate21號染色體開放閱讀框69抗體包裝100g

藜蘆(3,4-二氧基)(標準品) Pregabalin周期相關(guān)激抗體包裝500g

巴韋林(標準品) Procarbazine HCl癌相關(guān)抗原抗體包裝1g

(標準品) Procarbazine HCl半胱蛋白蛋白-6抗體(N端)包裝5g

(標準品) Procaterol HCl周期依賴性激3抗體包裝1g

福布?。藴势罚?/span> Propofol鈣調(diào)磷抗體包裝5g

福霉SV(標準品) Raloxifene HCl鈣蛋白1抗體包裝1g

微桿菌Microbacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含>99.0%纖維膠凝蛋白3試劑盒突厥烯;Damascenone

YIM61420資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP32,BR,可用于培養(yǎng)纖維蛋白原降解產(chǎn)物試劑盒脫氧熊果苷;Deoxyarbutin

展青霉Penicillium│patulum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品纖維蛋白原α鏈試劑盒11-羰基-Β-乙酰乳香;Acetyl
植物酸性磷酸酶提取試劑P53/FITC  熒光標記腫瘤抑制因(野生型P53)IgG羥萘藍 IND,94%(HPLC)

Mtp53/FITC  熒光標記突變型P53IgG對羥苯鈉 CP,98%

P53(wt-p53)/FITC  熒光標記腫瘤抑制因(野生型P53)IgG鉻鉛 AR,98.0%

wtp53/FITC  熒光標記野生型p53單克隆IgG二酰 97%

p53BP1/53BP1/FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠p53結(jié)合蛋白1IgG鎂試劑Ⅰ 高純級,90%

p53BP1(Ser25/29) /FITC  熒光標記兔抗人、大、小鼠化p53結(jié)合蛋白1IgG吐爾 AR,99.0%

phospho-P53 (Ser15) /FITC  熒光標記化腫瘤抑制因P53IgG四氧化三錳 SP

phospho-P53 (Ser37) /FITC  熒光標記化腫瘤抑制因P53IgG硫代硫鎂 超純級

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

 


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