公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測定意義:Na+K+- ATP酶廣泛分布于植物、動(dòng)物、微生物和細(xì)胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機(jī)磷。測定原理:Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及無機(jī)磷,通過測定無機(jī)磷的量來確定ATP酶活性。需自備的儀器和用品:可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測試面廣:可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,以便 不時(shí)觀察,待對照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
鹽阿可樂定/鹽安普樂定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Brivanib alaninate熱休克蛋白J2抗體包裝25g
鹽阿米洛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Gentiobiose雙特異性酪磷化調(diào)節(jié)激1B抗體包裝5g
鹽阿米洛雜質(zhì)(4-基-6--1,3-基二硫酰...英文名: Silodosin二?;视图?抗體包裝100g
鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: SilodosinDNA依賴蛋白激催化亞基抗體包裝25g
鹽阿莫羅芬/鹽阿莫洛芬 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Brimonidine tartrate 雙同源框蛋白4抗體包裝500g
鹽阿那格雷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Brimonidine tartrate 無精癥缺失基因1抗體包裝5g
鹽阿糖胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Imatinib磷化周期檢測點(diǎn)激2抗體包裝250mg
鹽阿扎司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Aliskiren Inter-5通道蛋白DRK1抗體包裝1g
鹽埃羅替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: GHKcu/Growth-modulating peptideGTP發(fā)育調(diào)控結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
鹽艾司洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Triamterene骨架4.1蛋白家族DAL1抗體包裝1G
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: TriamtereneDAP凋亡誘導(dǎo)蛋白激2抗體包裝5G
鹽安他唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Lafutidine信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能磷蛋白DAB2抗體包裝1g
鹽啉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Lafutidine命運(yùn)決定因子DACH1抗體包裝5g
鹽基葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Tocofersolan,VE-TPGSDab2相互作用蛋白抗體包裝10mg
鹽溴索(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Methoxyphenamine HCl線粒體2,4-雙烯酰還原1抗體包裝1g
亞德食烷菌Alcanivorax│jadensis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品唾液沙蟾精;Bufarenogin
香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP29唾液試劑盒D-四氫藥根堿;(R)-(+)-Cory
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品唾液過氧化物試劑盒沙苑子苷A;Complanatoside
Na+k+ ——ATP酶測試盒50管/24樣云芝栓孔 (變色栓) 十八烷基乙烯基尿鎘-金屬硫蛋白Elisa
假單胞 3-硝基-4-羥氨基氨基肽Elisa
羅伊氏乳桿 二乙二單乙烯基補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白3Elisa
大斑凸臍蠕孢 4-(3-吡啶基)苯酸頻哪酯磷酸糖異構(gòu)1Elisa
喜乳糖擬泡囊擔(dān)孢酵母 7-氨基庚酸白分化抗原CD109Elisa
谷棒桿Ⅲ型 3-溴-6--2-吡啶甲酸球蛋白重鏈可變區(qū)Elisa
大腸埃希 順-2-已烯-1-Igκ鏈V-I區(qū)HK102Elisa
黑附球 3-甲基-2-硝基三氟甲苯凝膠溶Elisa
無花果曲霉 叔丁基二苯基硅烷基三氟甲磺酸酯α黑色Elisa
銹赤蠟黃鏈霉 3-溴-5-三氟甲苯受體相互作用蛋白Elisa
膜醭假絲酵母 5-溴-2--3-吡啶CXC趨化因子受體7Elisa
堿線屬 3-羥基十六烷酸CXC趨化因子受體4Elisa
Rhizobium multihospitium 基溴化鎂(約的四溶液,約2mol/L)14-3-3蛋白betaElisa
甘蔗生節(jié)棱孢 4--1-14-3-3蛋白gammaElisa
根瘤 3-羥基-2-萘甲酰基-鄰-乙氧基苯14-3-3epsilonElisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。