詳細介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定意義AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中,催化葡萄糖-1-磷酸與ATP反應生成淀粉合成的直接前體ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步驟。 |
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產品貨號 | AS6321208 |
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內,棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
2''-O-p-反式香豆酰基葒草苷英文名: Boc-Val-OH葡萄糖氧化1抗體包裝1g
2''-O-p-香豆?;登G英文名: Boc-Asn-OH轉錄調節(jié)因子HOXD9抗體包裝5g
2''-O-鼠李糖基羊藿次苷II英文名: Boc-Gln-OH羥基酰解樣蛋白抗體包裝1g
2'-O-基苦參英文名: Boc-Ala-OSu熱休克蛋白受體家族蛋白7B2抗體包裝25g
2,3,5,4-四羥基二乙烯葡萄糖苷,二乙烯苷英文名: Boc-D-Ala-OHHeme結合蛋白2抗體包裝5g
2,3,5,4-四羥基二乙烯葡萄糖苷,二乙烯苷(標...英文名: Boc-?-Ala-OH肝粘附分子2抗體包裝1g
2,3-脫氫維英文名: Boc-?-iodo-Ala-OMe基己糖苷D抗體包裝5g
2,5,9-三羥基-4-氧基-9,10-二氫菲英文名: Boc-Arg-OH·HCl·H2OHHLA2蛋白抗體包裝1g
20(21)-脫氫赤芝A英文名: Nalpha-BOC-D-Arginine hydrochloride hydrate羥脯抗體包裝250mg
20(S)-原人參三(標準品)英文名: Boc-Arg(Mts)-OH·CHA熱休克蛋白10抗體包裝5g
21-O-順芷酰基匙羹藤新苷元英文名: Boc-Arg(NO2)-OH同源盒蛋白PRH抗體包裝1g
23-羥基龍吉苷元英文名: Boc-N-beta-Trityl-L-asparagine 羥類固脫氫17β抗體包裝5g
23-乙酰去氫澤瀉B英文名: Boc-Asn-(Xan)-OH皰疹病相關泛特異性蛋白7抗體包裝1g
23-乙酰澤瀉B;澤瀉B醋酯(標準品)英文名: Boc-L-Asp(OBzl)-OH同源異型盒基因HOXA5蛋白抗體包裝5g
24-乙酰澤瀉F英文名: Boc-L-Asp(OcHex)OH異染色質蛋白1-α(HP1α)抗體包裝1g
AS2.14資源名稱: 釀酒酵母 質量規(guī)格:>98.5%磷烯羧激,線粒體試劑盒6-姜烯;6-Shogaol
巨型艾耳球蟲Eimeria│maxima 質量規(guī)格:>98.5%磷葡萄糖脫氫試劑盒10-姜;10-Gingerol
曲霉Aspergillus│sp. 質量規(guī)格:>98.5%,BR磷PP2A癌性抑制物試劑盒氧醉椒 ;Yangonin
ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒50管/48樣芽孢桿 2-雙環(huán)已基膦-2 ',6'-二異氧基聯(lián)苯亞硝酸還原Elisa
臭曲霉 庚基-β-D-吡喃葡萄糖苷甘脫羧Elisa
茄鐮孢 2--3-吡啶絲乙酸轉氨Elisa
交鏈孢屬 3,5-雙(三氟甲基)苯甲酰甘甜菜堿Elisa
假絲酵母屬 4、4'-二氨基苯酰替苯嘔吐Elisa
大豆慢生根瘤 (S)-2,5-二氫-3,6-二甲氧基-2-異基吡乙酰乳酸合成Elisa
雙孢蘑菇 1-乙炔基-1-環(huán)己還原態(tài)煙酰腺二核苷酸磷酸Elisa
空腸彎曲桿 L-羥鈷氧化態(tài)煙酰腺二核苷酸磷酸Elisa
煙色毛霉 N,N'-雙芴甲氧羰基-L-賴GDP-L-半乳糖磷酸Elisa
Gillisia limnaea 4,5-二氟-2-GDP-D-甘露糖焦磷酸化Elisa
大腸埃希 硫酰幾丁質Elisa
柳巴克酵母 水合肼 一水合物谷脫羧Elisa
德爾布有孢酵母 高酸鈉 一水合物γ-氨基丁酸轉氨Elisa
綠針假單胞 化鈰(III)葡萄糖焦磷酸化Elisa
黃多孔 鎢酸鎘淀粉分支Elisa